制备高效液相色谱法分离制备葡萄果皮中二甲花翠素3- O- 葡萄糖苷单体

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摘要: 以1 %盐酸甲醇为提取剂提取葡萄果皮中的花色素苷, 通过Amberlite XAD- 7HP 大
孔吸附树脂对葡萄皮中花色素苷进行纯化后, 由高效制备液相分离纯化二甲花翠素3- O- 葡萄
糖苷单体。采用PREP- ODS(H)kit( 5 μm, 250×20 mm i.d.) 色谱柱, 流动相为水/ 乙腈/ 甲酸( 流动相A 为80/10/1.65; 流动相B 为40/50/1.05,v/v) , 测定波长535 nm, 流速11 mL/min, 室温, 进样量100 μL, 梯度: 0 min, 0 %B; 10 min, 10 %B; 20 min, 30 %B; 25 min, 50 %B; 30 min, 0 %B。结果表明, 产品单体纯度可达98.13 %, 经HPLC 分析与UV、MS 分析鉴定, 其分析图谱与数据同标准图谱及数据相一致。
    花色素苷是葡萄酒中主要的呈色物质, 它对葡萄酒的感官品质和保健功能有重要影响。花色素苷广泛存在于花、果实等植物细胞中, 使其呈现由红、紫红到蓝等不同的颜色。葡萄中的花色素苷主要分布于果皮、果肉、葡萄籽、芽鳞片等器官中, 以果皮中的含量最高[1]。葡萄果皮中的花色素苷通过浸渍发酵, 可部分转移到葡萄酒中, 成为葡萄酒最主要的呈色物质[2], 对葡萄酒的感官
品质有重要影响。Richard 在1987 年提出“法国悖论”之后, 对葡萄酒中多酚类物质的生理功能的研究发现,葡萄酒中花色素苷等多酚类物质具有预防心脑血管疾病、预防癌症等保健作用[3~6]。目前, 已明确花色素苷具有抗氧化、消除自由基、改善肝脏以及血清中的脂质、防止动脉硬化、抗变异原和抗肝炎及预防眼科领域疾病等功能[7~8]。
    探索HPLC 分离纯化花色素苷的条件和方法, 并研究利用葡萄皮制备二甲花翠素3- O- 葡萄糖苷单体的工艺流程, 获得高纯度的二甲花翠素3- O- 葡萄糖苷单组分物质, 为葡萄花色素苷研究提供对照品。
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