一株嗜热毁丝霉菌株产纤维素酶条件优化

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摘要: 以一株嗜热的毁丝霉H127-1 为出发菌株,对其产纤维素酶的液体发酵条件进行了研究。结果表明,最佳碳源为稻草粉,最佳氮源为黄豆粉。当添加一定量的金属离子时,Fe2+ 能显著促进H127-1 产CMC 酶以及β-葡萄糖苷酶,而Zn2+ 和Cu2+ 则极大地抑制了其产酶;Ca2+、Ba2+ 和Mg2+ 都能促进H127-1 产CMC 酶,但在一定程度上抑制了其β-葡萄糖苷酶的分泌。发酵液初始pH 值、装液量、接种量、发酵时间对H127-1 的产酶也有一定影响,最适宜条件为初始pH4、装液量30~50 mL/250 mL、接种量6 %~8 %、最佳发酵时间为2~4 d。
    纤维素酶是一个由多种水解酶组成的复合酶系,它们协同作用,分解纤维素产生寡糖和纤维二糖,最终水解为葡萄糖[1]。根据纤维素酶的底物、作用位点和释放产物以及纤维素降解机制可将其分为3 个主要类别: 内切葡聚糖苷酶(endo-1,4-β-D-glucanase,EC3.2.1.4)、外切葡聚糖苷酶(exo-1,4-β-D-glucanase,EC3.2.1.91)和β-葡萄糖苷酶(β-1,4-glucosidase,EC3.2.1.21)[2]。由于高温条件有助于发酵原料混合和溶解,进而提高原料的利用率,而且高温还能减少污染的风险, 因此耐高温酶的研究成为热点[3]。自1906 年首次在蜗牛消化道发现以来,纤维素酶一直备受关注。为了满足工业生产的需要,对纤维素酶也要求有较好的稳定性, 尤其是酿造这种高温产业更要求纤维素酶有较好的热稳定性。在白酒、啤酒、果酒、酱油等酿造工艺中加入适量的纤维素酶能显著提高原料的利用率、缩短发酵时间、提高产品品质[4]。另外,纤维素酶在食品、纺织、饲料、生物能源等工业应用上也具有重要的地位[5]。
    目前,市面上的纤维素酶大多酶活不高且稳定性差。另外,产酶所用的原料成本较高,这些都使得纤维素酶的价格普遍偏高[6]。为了减少纤维素酶的生产成本,目前的研究主要集中在3 个方面: ①获得高产且酶学性质稳定的菌株;②培养条件的优化;③生产工艺的模式化[7]。本实验对1 株在30~55 ℃条件下都能较好生长的嗜热毁丝霉菌株H127-1 产纤维素酶的培养条件进行了优化,为推进纤维素酶商业化的应用提供一定的理论支持。
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