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柑橘果实中蔗糖、果糖、葡萄糖、柠檬酸、苹果酸、奎宁酸的含量测定

信息来源: 用户案例 认证实验室
星级评定:

方法概述

仪器材料

分析步骤

交流讨论

测定柑橘果实中蔗糖、果糖、葡萄糖、柠檬酸、苹果酸、奎宁酸六种物质的含量。

标准谱图

样品谱图

混标分离谱图

色谱峰

苹果酸 (5.224) 11 Ribitol (8.828) 2 柠檬酸 (10.268) 15 奎宁酸 (11.129) 3 果酸1 (11.379) 4 果酸2 (11.552) 4 葡萄糖1 (11.837) 3 葡萄糖2 (12.142) 3 蔗糖 (22.507) 5

色谱条件

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检测器

检测器型号:FID

果糖的分离谱图

色谱峰

果酸1(11.347) 4 果酸2(11.522) 4

果糖的分离谱图

色谱峰

果酸1 (11.347) 4 果酸2 (11.522) 4

果糖的分离谱图

色谱峰

果酸1(11.347) 4 果酸2(11.522) 4

色谱仪器

GC-9720Plus

厂家:浙江福立分析仪器股份有限公司

1 福立GC9720Plus气相色谱仪

2 反控工作站

3 试剂:正己烷,甲醇,吡啶,氯仿,ddH2O(二次蒸馏水),液氮,甲氧胺盐酸盐,N-甲基-N-三甲基硅烷三氟乙酰胺(MSTFA),蔗糖、侧金盏花醇、果糖、葡萄糖、柠檬酸、苹果酸、奎宁酸

试剂及材料

RBX-5  30m0.32mm0.25μm0

1柑橘果实汁胞样品的提取
柑橘汁胞样品经液氮充分研磨后准确称取一定质量(0.1g)于2ml螺口离心管中,加入1.4ml75%甲醇(-20℃预冷)涡旋震荡10s;加入100μl内标Ribitol(侧金盏花醇)(1.2mg/ml)涡旋震荡10s后于70℃金属浴中950rpm浸提30min。
2样品提取液蛋白质的去除
将提取液12000rpm离心15min,转移上清液于5ml玻璃离心管中,加入750μl氯仿(-20℃预冷),并加入1.5mlddH2O(4℃预冷),涡旋振荡10s,3600rpm离心15min,取50μl上清液于2ml离心管中进行真空旋转蒸干。
3衍生化反应
向上述离心管中加入40μl甲氧胺盐酸盐溶液(20mg/ml,溶于100%吡啶),37℃、950rpm ,金属浴震荡2h。12000rpm离心1min。加入60μl的MSTFA,37℃、300rpm震荡30min,转移至含内衬管进样瓶中。

请问C18液相色谱柱可以将衍生化的葡萄糖和果糖分开吗?

周成祥
葡萄糖,果糖必须用氨基柱、糖分析柱,或者阳离子色谱柱。
衍生化的样品,气相色谱就可以做。没有看到衍生化后用C18做的案例。
这里是一些参考谱图,你看看:
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