小程序
微信小程序
人工客服
回顶部

二维高效液相色谱法测定血清中两性霉素B

信息来源: 福立仪器温岭应用中心 认证实验室
星级评定:
微信二维码

方法概述

仪器材料

分析步骤

系统结构


流动相

第一维流动相:甲醇/乙腈/水(25 mmol/L磷酸铵盐水溶液)= 1/3/3(V/V/V),0.7 mL/min。

第二维流动相:水(25 mmol/L磷酸铵盐水溶液)/水(1.0 mmol/L磷酸氢二铵溶液)/甲醇/乙腈= 10/35/10/45(V/V/V/V),1 mL/min。

辅助流动相:纯水。


线性和灵敏度

对0.06、0.32、0.79、2.14、4.92、12.31 μg/mL的两性霉素B基质标准液进行分析,以峰面积(y)对质量浓度(x,μg/mL)进行线性回归,得线性方程为y = 683050x + 0,r为0. 999 9, 相关性良好。

方法检出限(S/N= 3)为0.01 μg/mL,定量限(S/N= 10)为 0.04 μg/mL。


精密度和准确度

在0.40、2.00、8.00 μg/mL三个加标水平下,5个平行试验的检测方法回收率在98.79% ~ 99.39%之间,提取回收率在98.50% ~ 99.00%之间,RSD<3.00%。


色谱图

标准谱图

色谱峰

两性霉素B (6.5min) 0

色谱仪器

LC5090

厂家:浙江福立分析仪器有限公司

2台高压恒流泵,1台二极管阵列检测器,1台自动进样器,1台柱温箱(内置3根色谱柱,1个两位六通切换阀)

试剂及材料

捕集柱Aston SCB色谱柱(3.5 μm,4.6×10 mm)

样品前处理

将血浆样品以3000 转/min低速离心5 min,精密吸取血浆样品400 μL至2 mL EP管中,加入乙腈去蛋白剂1000 μL, 涡旋振荡1 min,再以14500 转/min高速离心8 min, 然后取上层清液1000 μL 至进样瓶中待测,进样量为300 μL,采用外标工作曲线法进行定量分析。

友情链接(联系QQ:47140047)
关于我们  经营理念  业务合作  联系我们  法律声明  网站建议  网站导航  帮助中心
Copyright © 色谱世界 版权所有 陇ICP备2024006362号-2