试样中的 5-氨基乙酰丙酸经丹磺酰氯衍生,反相液相色谱分离,紫外检测器检测,根据色谱峰
的保留时间定性,外标法定量。
标准谱图
样品谱图
精准度
5-氨基乙酰丙酸样品溶液谱图
色谱峰
标准曲线
说明:(1)本方法采用 5-氨基乙酰丙酸经丹磺酰氯衍生化后,使用 C18 色谱柱进行测定,
由于衍生化条件对最终衍生物产物有较大影响,因此需要严格按衍生化条件进行实验操作。
(2)本方法在测定范围 0.01-0.3mg/mL 之间,有很好的线性关系,标准曲线相关系数 R 2为
0.99981。客户可以根据样品含量选择合适的浓度范围,建议最少使用 5 个浓度点建立标准曲线。
(3)本方法是将 5-氨基乙酰丙酸经过衍生化后测定,因此每次实验必须做空白溶液的衍生化
实验,并且应尽量减小空白对样品溶液含量的影响。
以上数据仅供参考,如有问题请电话联系。
5-氨基乙酰丙酸样品溶液谱图
色谱峰
5-氨基乙酰丙酸样品溶液谱图
色谱峰
标准曲线
说明:(1)本方法采用 5-氨基乙酰丙酸经丹磺酰氯衍生化后,使用 C18 色谱柱进行测定,
由于衍生化条件对最终衍生物产物有较大影响,因此需要严格按衍生化条件进行实验操作。
(2)本方法在测定范围 0.01-0.3mg/mL 之间,有很好的线性关系,标准曲线相关系数 R 2为
0.99981。客户可以根据样品含量选择合适的浓度范围,建议最少使用 5 个浓度点建立标准曲线。
(3)本方法是将 5-氨基乙酰丙酸经过衍生化后测定,因此每次实验必须做空白溶液的衍生化
实验,并且应尽量减小空白对样品溶液含量的影响。
以上数据仅供参考,如有问题请电话联系。
色谱仪器
LC5090
1 液相色谱仪: LC5090 液相色谱仪(含 LC5090 在线脱气机+LC5090 二元高压输液泵
+LC5090 自动进样器+LC5090 柱温箱+LC5090 双波长-紫外检测器)
2 分析天平:感量 0.0001 g
3 微孔滤膜:0.45μm,聚四氟乙烯(PTFE)
4 烘箱:鼓风干燥箱,控制温度。
试剂及材料
1 乙腈:色谱纯。
2 水:纯水。
3. 丙酮:分析纯。
4 盐酸:分析纯。
5 乙酸铵: 分析纯。
6 碳酸氢钠:分析纯
7 乙酸铵溶液(5mmol/L):称取 0.38 g 乙酸铵(4.1.5),加水溶解,定容至 1L。
8 氢氧化钠溶液(2mol/L):准确称取 8g 氢氧化钠,用水定容至 100mL。
9 0.2mol/L 的 NaHCO3衍生反应缓冲液(pH9.0): 称取 16.8gNaHCO3,用水溶解并定容至
1L。用 2mol/L 氢氧化钠溶液(4.1.8)调 pH 值至 9.0,冰箱中保存备用。
10 盐酸溶液(0.01 mol/L):准确量取 0.83 mL 浓盐酸,用水定容至 1L。
11 丹磺酰氯衍生溶液(8mg/mL):称取 0.8g 丹磺酰氯(CAS 号:605-65-2,≥99%),用丙酮
(4.1.3)溶解,定容至 100 mL。4℃下保存备用。
12 5-氨基乙酰丙酸标准储备溶液(2.64mg/mL):准确称取客户提供的 5-氨基乙酰.丙酸标准
品 26.4mg,用水溶解并稀释至 10mL 。
13 标准系列溶液:确移取不同体积 5-氨基乙酰丙酸标准储备溶液(2.64mg/mL) (4.1.12)于
10mL 棕色容量瓶中,用 0.2mol/L 的 NaHCO3衍生反应缓冲液(pH9.0)(4.1.9)稀释定容配成系
列标准溶液,浓度分别为: 0.01mg/mL,0.05 mg/mL,0.1 mg/mL,0.2 mg/mL,0.3 mg/mL。临
用现配
