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饲料中维生素B1, B2和B6的测定

信息来源: 兰州应用中心 认证实验室
星级评定:
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方法概述

仪器材料

分析步骤

试样经反相液相色谱分离,紫外检测器检测,根据色谱峰的保留时间定性,外标法定量。

标准谱图

样品谱图

精准度

维生素B1、B2和B6混合标准溶液谱图及结果

色谱峰

维生素B6 (7.755) 1 维生素B1 (17.860) 0 维生素B2 (23.218) 0

色谱条件

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检测器

检测器型号:UV(紫外光检测器)

维生素B2标准溶液谱图

色谱峰

维生素B2 (23.368) 0

维生素B6标准溶液谱图

色谱峰

维生素B6 (7.824) 1

维生素B1、B2和B6混合标准溶液谱图及校准曲线

色谱峰

维生素B1 (18.009) 0

鸡鸭全营养中维生素B1谱图

色谱峰

维生素B6(7.796) 1 维生素B1(17.974) 0 维生素B2(23.345) 0

鸡鸭全营养中维生素B2谱图

色谱峰

维生素B6(8.062) 1 维生素B1(18.595) 0 维生素B2(24.110) 0

鸡鸭全营养中维生素B6谱图

色谱峰

维生素B6(7.807) 1 维生素B1(17.978) 0 维生素B2(23.291) 0

维生素B6校正曲线

维生素B1校正曲线

维生素B2校正曲线

鸡鸭全营养中维生素B1谱图

色谱峰

维生素B6 (7.796) 1 维生素B1 (17.974) 0 维生素B2 (23.345) 0

鸡鸭全营养中维生素B2谱图

色谱峰

维生素B6 (8.062) 1 维生素B1 (18.595) 0 维生素B2 (24.110) 0

鸡鸭全营养中维生素B6谱图

色谱峰

维生素B6 (7.807) 1 维生素B1 (17.978) 0 维生素B2 (23.291) 0

鸡鸭全营养中维生素B1谱图

色谱峰

维生素B6(7.796) 1 维生素B1(17.974) 0 维生素B2(23.345) 0

鸡鸭全营养中维生素B2谱图

色谱峰

维生素B6(8.062) 1 维生素B1(18.595) 0 维生素B2(24.110) 0

鸡鸭全营养中维生素B6谱图

色谱峰

维生素B6(7.807) 1 维生素B1(17.978) 0 维生素B2(23.291) 0

维生素B6校正曲线

维生素B1校正曲线

维生素B2校正曲线

色谱仪器

LC5090

厂家:浙江福立分析仪器有限公司

1.液相色谱仪: LC5090 液相色谱仪(含 LC5090 在线脱气机+LC5090 四元高压输液泵 +LC5090 自动进样器+LC5090 柱温箱+LC5090 双波长-紫外检测器) 

2 微孔滤膜:0.45μm 有机滤膜,0.45μm 水系滤膜。 

3 分析天平:精度 0.0001g。 

4 恒温水浴锅。 

5  50mL 离心管。 

6 高速离心机。

7 涡旋振荡器。

8 流动相抽滤装置 

9 PH 计:精度为 0.01 

试剂及材料

1 二水合乙二胺四乙酸二钠(EDTA)优:优级纯 

2 水:纯水 

3 庚烷磺酸钠:离子对试剂 

4 冰乙酸:优级纯。 

5 三乙胺:优级纯。 

6 甲醇:色谱纯。 

7 盐酸:优级纯 

8 磷酸二氢钠溶液:3.9 g 磷酸二氢钠溶于 1000 mL 超纯水中,过 0.45 μm 水系滤膜。 

9 提取剂 1:在 1000 mL 容量瓶中,称 50 mg(精确至 0.001 g)EDTA, 依次加入 700 mL 去离子水,超声使 EDTA 完全溶解。加入 25 mL 冰乙酸,5 mL 三乙胺,用去离子水定容至刻度, 摇匀。

10 提取剂 2:在 1000 mL 容量瓶中,称 50 mg(精确至 0.001 g)EDTA, 依次加入 700 mL 去离子水,超声使 EDTA 完全溶解。加入 25 mL 冰乙酸,5 mL 三乙胺,用去离子水定容至刻度, 摇匀。取该溶液 800 mL 与 200 mL 甲醇混合,超声脱气,待用。 

11 流动相:在 1000 mL 容量瓶中,称 50 mg(精确至 0.001g)EDTA、1.1 g(精确至 0.001g)庚 烷磺酸钠,依次加人 700 mL 去离子水,25 mL 冰乙酸、5 mL 三乙胺,用去离子水定容至刻度, 摇匀。用冰乙酸、三乙胺调节该溶液 pH 至 3.70 士 0.10,过 0.45 um 滤膜。取该溶液 800 mL与 200 mL 甲醇混合,超声脱气,备用

1 维生素 B1 标准使用溶液:将客户提供的维生素 B1 标准溶液,用流动相稀释为维生素 B1 浓度 2.097μg/mL 标准使用溶液。 

2 维生素 B2 标准使用溶液:将客户提供的维生素 B2 标准溶液,用提取剂 1(4.1.9 提取剂 1) 稀释为维生素 B2 浓度 4.99μg/mL 标准使用溶液。 

3 维生素 B6 标准使用溶液:将客户提供的维生素 B6 标准溶液,用磷酸二氢钠溶液(4.1.8 磷 酸二氢钠溶液)稀释为维生素 B6 浓度 2.06μg/mL 标准使用溶液。 

4 维生素 B1、B2 和 B6 混合标准使用溶液:将客户提供的维生素 B1、B2 和 B6 标准溶液, 用提取剂 2(4.1.10 提取剂 1)稀释为维生素 B1 浓度 2.097μg/mL、维生素 B2 浓度 4.99μg/mL 和维生素 B6 浓度 2.06μg/mL 混合标准使用溶液。 5.5 鸡鸭全营养样品溶液:按客户提供的方法称取客户提供的鸡鸭全营养样品 0.4026g(维生素 B6)、0.4076g(维生素 B1)和 0.4074g(维生素 B2),按各自的方法分别处理样品,待测

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