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不同浓度Cd_2_对鲤鱼基因组DNA的影响

贾伟涛 | -> | 372| 0| 1.663506MB |镉,鲤鱼,DNA甲基化,重金属污染

贾伟涛 贾伟涛 | 文档量 |浏览量3921

摘 要 鲤鱼(建鲤品种)幼鱼暴露于4个浓度组(0.005、0.05、0.5、5 mg/L)的镉离子(Cd2+)2 d,期间各组的个体均无死亡. 用10个RAPD引物对处理后鲤鱼基因组进行扩增,亦未发现有明显的差异扩增条带. 但在用甲基化敏感扩增多态性方法研究暴露后鲤鱼肌肉组织的基因组DNA甲基化的变化时发现,5 mg/L的Cd2+在d 2会使鲤鱼基因组DNA中CCGG区域甲基化发生明显的变化. 该组个体1 mo后出现大量死亡. 另外,0.05 mg/L和0.5 mg/L Cd2+组个体基因组DNA中CCGG区域甲基化比例2 d内略有下降,甲基化位点没有太大改变. 说明鲤鱼幼鱼基因组CCGG区域的胞嘧啶甲基化比例在不同浓度Cd2+处理中都比较稳定. 低浓度Cd2+条件下鲤鱼主要通过甲基化区域的微调减少Cd2+的生理毒性. 高浓度Cd2+处理下,利于基因组DNA甲基化区域发生相当的变化,可能导致一些沉默基因的异常表达. 图2 表2 参31
    重金属对水环境的污染与人们的日常生活休戚相关,是一个倍受关注的研究领域. 有监测分析认为,水环境主要的重金属污染为汞,其次为镉. 其中对于镉污染的研究有很多报道,国内主要集中在镉的积累、富集及转移规律[1~4],生物对镉毒性的生理反应[5~6],如何评价镉污染和修复镉污染的土地[7~9]等方面. 国外最近对镉的研究也多集中在生物体对镉的吸收和富集作用以及镉对动物遗传生理方面的影响[10~13]等领域.
    对于镉在遗传上的影响研究过去多集中在镉对基因组DNA的损伤上. 最常见的检测DNA损伤方法是单细胞凝胶电泳技术(Single cell gel electrophoresis,SCGE)和随机扩增多态性DNA(Random amplified polymorphic DNA,RAPD)分析. 但是SCGE只能定性显示DNA损伤程度,而RAPD方法只能提供一些差异性扩增条带[14~16],进一步寻找可以定性指示DNA损伤的序列则鲜有相关的研究报道. 基因组DNA的变化还包括DNA的表观修饰,最常见的DNA表观修饰是胞嘧啶甲基化,它普遍存在于脊椎动物和很多低等动物中. 一些研究者认为胞嘧啶甲基化修饰可以阻止DNA的降,所以镉对基因组DNA甲基化的影响也有一些研究报道,结果显示重金属(镉、铅等)离子能提高很多生物不同组织的基因组DNA甲基化水平,如鲫鱼的肝脏、肾脏和鱼鳃[17],泥鳅肌肉组织[18],水稻和小麦叶片[19]等. 但他们采用的都是高效液相色谱(HPLC),该技术只能从DNA组成上定性描述基因组DNA甲基化的变化,很难进一步深入了解基因组DNA甲基化变化的具体位置.
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