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固相萃取精制苦瓜皂苷工艺研究

李宛儿 | -> | 751| 1| 359.147MB |苦瓜皂苷,固相萃取(SPE),高效液相色谱(HPLC)

李宛儿 李宛儿 | 文档量 |浏览量4382

摘 要:以苦瓜为原料,建立了SPE 精制、HPLC 检测、ESI2MS 定性为主要步骤的苦瓜皂苷的分析方法。通过HPLC 测定,得到了SPE 精制的最佳工艺条件为:上样p H 为8 ,经10 %、20 %乙醇各15 mL 淋洗后用10 mL 40 %乙醇淋洗,洗脱液为65 %乙醇,洗脱体积为7 mL ,流速为1 mL/ min ,此条件下所得液相色谱的峰数、峰形、峰面积均较理想。测得最佳条件下精制的苦瓜总皂苷含量为82. 13 %。经ESI2MS 定性分析得出,精制后的产物为三萜类皂苷。苦瓜皂苷快速分离方法的研究,对其构效关系和生物活性研究提供了重要的前提条件。
    苦瓜皂苷具有降血糖、抗氧化、提高免疫力、降低胆固醇、抗艾滋病毒和抗肿瘤等生理功能[1 ] 。
    在其分离纯化方面,大都用硅胶柱层析或聚酰胺柱层析,这些方法耗时长,有机溶剂使用量大,耗能多。而固相萃取( SPE) 具有回收率高,分离效果好,避免乳化现象,操作简单、省时,省力等优点。且由于SPE 内的填充物,可与高效液相色谱柱的填充物相同,所以经SPE 分离后的物质再经高效液相分析,可以有效地保护仪器,延长色谱柱的使用期限。
    本文尝试应用固相萃取装置探讨苦瓜皂苷的高效分离方法,用高效液相色谱对分离后的结果进行分析。研究苦瓜皂苷的快速分离纯化,对进一步研究其构效关系和生理功能具有重要意义。
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