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逍遥丸的毛细管电泳指纹图谱的建立

张卓 | -> | 1403| 2| 0.318599MB |毛细管电泳指纹图谱,正方形优化法,系统指纹定量法,色谱指纹图谱分离量指数,逍遥丸

张卓 张卓 | 文档量 |浏览量29125

摘要: 采用毛细管区带电泳法建立了逍遥丸( Xiaoyao Pill,XYP) 的毛细管电泳指纹图谱(CEFP) 。运用正方形优化法,以色谱指纹图谱分离量指数( RF) 为优化的目标函数,对建立指纹图谱的实验条件进行了优化,确定了最佳背景电解质( BGE) 溶液50 mmol /L 硼砂-50 mmol /L 磷酸氢二钠-150 mmol /L 磷酸二氢钠-50 mmol /L 碳酸氢钠( 1∶ 1∶ 1∶ 5,v /v /v /v; pH 7. 40) 、紫外检测波长228 nm、运行电压12 kV、重力进样25 s ( 高度14 cm) 的分离检测条件。采用未涂层石英毛细管( 70 cm × 75 μm,有效分离长度57 cm) 分离,以咖啡酸色谱峰为参照,确定13 批逍遥丸样品的21 个共有指纹峰。通过聚类分析确定用其中10 批样品生成对照CEFP,以此为标准用系统指纹定量法鉴别13 批逍遥丸的质量,结果显示: S3 号样品的化学成分数量和分布比例不合格,S10 和S12 号样品含量明显偏高,其余批次质量均合格。所建立的正方形优化法操作简便,适用于中药的毛细管区带电泳BGE 的选择; 所建立的逍遥丸CEFP 具有较好的精密度和重现性,可以为逍遥丸的质量控制提供新的参考。
    逍遥丸( XYP) 每丸含柴胡0. 054 g、当归0. 054g、白芍0. 054 g、白术( 炒) 0. 054 g、茯苓0. 054 g、炙甘草0. 043 g、薄荷0. 011 g 和生姜0. 054 g,共8 味组方药。功能为疏肝健脾,养血调经。用于中医治疗肝郁脾虚所致的郁闷不舒、胸胁胀痛、头晕目眩、食欲减退、月经不调[1]等病症。文献中有对逍遥丸中芍药苷[1]、阿魏酸[2]含量的测定方法,也有采用
气相色谱( GC) 测定其中挥发性成分和指纹图谱的研究[3],但尚未见有关其毛细管电泳指纹图谱( CEFP) 的报道。中药作用的特点是通过多成分、多靶点及多途径来调节人体机能。目前,虽然逍遥丸的具体作用机理尚不明确,但单一成分的含量测定显然很难完全反映中药所体现的整体疗效的物质基础。指纹图谱能够较为宏观、综合地反映中药的内在质量,这种观点已被国内外研究者所认可[4,5],近年来对中药的CEFP 研究也有了很大进展,其具有分析速度快、进样量少、分离效率高、试剂消耗少及抗污染能力强等特点,可以弥补高效液相色谱( HPLC) 分析中药成分时存在的缺陷,具有很多潜在的优势[6],非常适合中药复杂体系的分离分析。因此,本文利用毛细管区带电泳法( CZE) 对13 批逍遥丸进行指纹图谱的研究,从整体化学角度进行综合定性定量分析,从而鉴别XYP 的质量。目前,有关毛细管电泳实验条件优化选择方法主要有粒子群优化算法[7]、响应曲面法[8]、三角形和四面体法优化背景电解质( BGE) 等方法[9]。正方形优化法方法操作简单、快速,较三角形和四面体法更适于BGE 的优化选择,因此,本文采用正方形法优化选择最佳的BGE,取到了较好的分离效果; 在此基础上,建立了XYP-CEFP 的测定方法,并采用系统指纹定量方法评价了批间的质量差异,为XYP 的质量控制提供了新的参考。
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