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液相色谱-串联质谱分析盐胁迫下植物激素的含量变化

中国科学 | -> | 2187| 12| 1.45038MB |色谱,串联,胁迫,植物,激素,含量,变化,

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摘要 建立了高效液相色谱-离子阱串联质谱高灵敏、快速测定多种内源植物激素的新方法. 在最佳条件下, 吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)和赤霉酸(GA3)在5 min 内实现完全分离, 最低检测限为8.0 ng·mL–1. 借助串联质谱技术, 解释了三种激素的结构碎裂过程. 探讨了盐胁迫下, 上述内源激素含量的变化趋势. 研究表明, 随着NaCl 浓度增大, IAA 和GA3 含量降低, ABA 含量明显升高. 初步揭示了内源激素和
植物抗盐性之间的相互关系.
    作为痕量信号分子, 植物激素对植物的正常生长起着至关重要的作用. 吲哚乙酸(IAA)作为生长素
的代表, 能调控细胞的分裂、分化和伸长等多种生理过程; 赤霉酸(GA3)可控制茎的伸长、打破种子休眠、控制开花和性别表达等; 脱落酸(ABA)被普遍认为是逆境激素, 调节胚胎发育、种子萌芽、气孔关闭、细胞分裂和茎的生长等生理现象[1]. 大量研究表明,IAA、ABA、GA3、乙烯和多胺等激素都与植物抗逆过程有关[2,3].
    土壤中盐分过多对植物的正常生长发育造成的危害称盐害或盐胁迫. 其中, NaCl 是造成盐分过高的主要盐类. 随着土地盐碱化日益严重, 在干旱半干旱地区越来越多地使用盐水灌溉, 盐害已成为继干旱之后的第二大环境问题. 盐胁迫时, 植物内源激素含量发生变化, 从而调控植物一系列的生理和生化反应. 因此, 研究植物激素与抗逆性之间的关系就显得至关重要.
    鉴于植物激素的重要作用, 对其定量检测已引起了广泛的关注. 一些现代分析测试技术已用于测
定单种或多种激素, 包括液相色谱法(HPLC)[4,5]、气相色谱法(GC)[6]、气质联用法(GC-MS)[7,8]、毛细管电泳法(CE)[9,10]等. 较以上这些方法, HPLC-MS 具有更强的定性定量能力. 已有HPLC-MS 用于测定IAA[11,12]和ABA[11,13]的报道, 鲜见用于测定GA3.2008 年前, 用LC-MS/MS 同时测定多种植物内源激素的报道非常稀少. 最近, Ma 等[14]建立了LC-MS/MS 测定椰子汁中的不同类植物激素. 在Ma 等的工作中, 对IAA 和ABA 的断裂途径有简单涉及, 但未提及GA3 的具体结构解析过程. 其方法的定量限为微摩尔级, 未能满足实际样品中植物激素的痕量分析要求. 此外, Hou 等[15]近期也报道了小麦提取物中IAA, ABA 和GA3 的同时检测方法, 但其所需分离时间长, 分离效率不高. 与上述研究相比, 本文构建的高效液相色谱-离子阱串联质谱(HPLC-IT-MS/MS)具有高灵敏度和快速分离检测IAA, GA3 和ABA 的特点, 且对其质谱结构碎片进行了合理的推测解释, 并探讨了盐胁迫下三种内源激素的变化趋势, 有利于进一步研究植物的抗逆机理.
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