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原料奶_婴儿配方奶粉及酸奶中蛋白去除效果的研究

郭金金 | -> | 907| 2| 0.338538MB |乳制品,婴儿配方奶粉,酸奶,蛋白质,毛细管电泳

郭金金 郭金金 | 文档量 |浏览量10001

摘要建立了毛细管电泳法分析α-乳白蛋白、β-乳球蛋白A 及β-乳球蛋白B 的方法,考察了不同浓度冰乙酸(HAc)及三氯乙酸(TCA)对原料奶、婴儿配方奶粉A 和B 及酸奶中蛋白的去除效果。结果表明,TCA 去除蛋白效果优于HAc,不同样品所需TCA 浓度不同:2 g 原料奶需3 mL 100 g /L TCA;0. 5 g 婴儿配方奶粉A 和B分别需5 mL 10 g /L 及20 g /L TCA;2 g 酸奶则需3 mL 20 g /L TCA 才能将蛋白完全沉淀。为原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶等乳制品的样品前处理提供了有价值的参考。
    色谱法分析原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶等乳制品中有益或有害化学成分时,必须除去其中的蛋白以得到准确结果,因为蛋白很容易在色谱柱上产生不可逆吸附,导致柱效下降。牛奶蛋白主要由酪蛋白和乳清蛋白组成,其中酪蛋白约占总蛋白的80%,乳清蛋白约占15%。乳清蛋白是酪蛋白沉淀后上清液中含有的蛋白[1],主要由α-乳白蛋白(α-Lac)、β-乳球蛋白(β-Lg)、免疫球蛋白G (IgG)和牛血清白蛋白(BSA)组成。其中α-Lac 约占乳清蛋白的3%,β-Lg 约占9%,IgG 约占2%,BSA 约占1%,其它为非蛋白氮(NPN)[2]。而β-Lg 又由β-LgA 及β-LgB 组成。
    冰乙酸(HAc)及三氯乙酸(TCA)是常用蛋白沉淀剂。文献报道的使用量一般为1%[3,4],该用量能否将上述3 种样品中的蛋白去除干净,需分析蛋白沉淀后的样品上清液中是否仍有蛋白残留。因此,有必要建立能够准确测定乳清蛋白中含量较高的α-Lac,β-LgA 及β-LgB 的方法,以监测去除蛋白前后3 种蛋白含量的变化,获知蛋白的去除效果。
    毛细管电泳(CE)法因其非常适合蛋白分析而成为首选方法。常用的CE 法一般利用涂层管或裸
管,通过往分离缓冲液中添加高分子聚合物以实现蛋白分离[5,6]。有关α-Lac,β-LgA 及β-LgB 分离的研究已见报道[7,8],但无定量数据。本研究建立了CE 同时分离并测定α-Lac,β-LgA 及β-LgB 的方法,考察了HAc 和TCA 对原料奶、婴儿配方奶粉及酸奶中蛋白的去除效果。
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