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香菇蛋白的分级纯化和结构分析

张芸 | -> | 2119| 4| 0.345163MB |香菇,蛋白,分级,结构

张芸 张芸 | 文档量 |浏览量96101

摘 要:香菇粉经10 ℃ pH 10的水提取制备香菇蛋白,得率13. 1% ,其蛋白含量47. 5% ,多糖含量24. 2%。香菇蛋白经DEAE Sepharose CL26B柱层析分级得5个级分,收集级分F1、F2、F3、F4,它们都是由蛋白和多糖构成的复合物。Sepharose CL26B凝胶色谱显示, F2和F4的分子量分布较为均匀,且以蛋白为主,多糖含量很低; F3主要由两个分子量不同的蛋白级分构成,含有一定的多糖; F1中多糖含量较高,蛋白含量较少,且多糖分子量分布均匀。香菇蛋白的分子量主要集中在20 kDa~40 kDa之间。F1、F3、F4都属于酸性蛋白质,含有除色氨酸之外的7种必需氨基酸,除蛋氨酸含量较低外,其余必需氨基酸含量接近,且赖氨酸含量较高。红外光谱分析表明,香菇蛋白的二级结构主要为α2螺旋和无规卷曲。
    香菇(Lentinus edodes)是我国的特色食用菌,产量居世界第一位。香菇富含多种营养保健成分[1 ] ,目前国内外对香菇多糖的研究报道较多[ 2 ] ,而对香菇中其他功能成分的研究开发很少。根据我们的分析结果,香菇干粉的蛋白含量为21. 8% (凯氏定氮法) 。如果在提取香菇多糖的同时,能够将蛋白等功能成分一并提取出来,则能充分利用香菇原料资源,提高产品的附加值,促进香菇产业的快速发展。
    本文利用香菇蛋白与多糖溶解性的差异,先将蛋白提取出来,残余物用于提取多糖。对提取出的香菇蛋白,采用离子交换和凝胶过滤柱层析进行了分级纯化,并对各级分的分子量、氨基酸组成和红外
光谱进行了分析。
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