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二碘荧光素与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究

赵烨华 | -> | 624| 1| 424.76MB |二碘荧光素,牛血清白蛋白,荧光猝灭,结合反应

赵烨华 赵烨华 | 文档量 |浏览量11540

摘 要 用荧光光谱法和分光光度法研究了水溶液中二碘荧光素( DIF) 与牛血清白蛋白( BSA) 的相互结合反应。研究表明BSA 与DIF 的结合数为n= 1. 05。其平衡常数K A = 6. 76×105L/ mo l。根据Forster非辐射能量转移理论, 求算了给体( BSA) 受体( DIF) 间的距离r= 2. 36nm 和能量转移效率E= 0. 59。实验表明, 二碘荧光素与牛血清白蛋白相互结合造成的荧光猝灭为单一的荧光静态猝灭过程。
    白蛋白是主要的血清蛋白, 它能和许多内源、外源性物质结合[ 1] 。一些小分子染料与蛋白质结合, 可引起染料或蛋白质光谱特性的变化, 因此可作为蛋白质的探针[ 2, 3] 。从而可以从分子水平的角度认识蛋白质与小分子相互作用机理, 为生命科学研究以及药物研究提供有用的信息。
    荧光素类化合物可以呈现强烈的荧光发射, 常用做指示剂和生物细胞染色剂。这类化合物在结构上的特殊性导致了它们的理化性质具有某些特性。现在荧光素类化合物在光度分析中已用于金属离子的测定、有机分子、蛋白质研究领域[ 4, 5] , 有关荧光素用于牛血清白蛋白定量测定的研究已见报道[ 6] 。对这类结合反应的作用机理和平衡规律尚在研究中。本文研究了DIF 和BSA 的相互作用,探讨了DIF 对BSA 荧光的猝灭机理, 测得了DIF 和BSA 的结合常数、结合位点数。根据Forster 非辐射能量转移理论, 求算了给体( BSA) 受体( DIF) 间的距离及能量转移效率。
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