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使用圆二色性光谱和红外光谱研究冬小麦麸皮抗冻蛋白的二级结构

秦华 | -> | 1107| 0| 0.393694MB |冬小麦麸皮抗冻蛋白,二级结构,傅里叶变换,红外光谱,圆二色性光谱,酰胺Ⅰ带和Ⅲ带

秦华 秦华 | 文档量 |浏览量14174

摘 要 使用圆二色性光谱和红外光谱技术对冬小麦麸皮抗冻蛋白的二级结构进行了研究。由于冬小麦麸皮抗冻蛋白在酰胺Ⅰ带和Ⅲ带位置中, 各个特征峰相互叠加, 因此采用Gausse 峰型对圆头峰进行拟合、解析, 判断其α2helix ,β2sheet ,β2turn 和Random coil 的相对含量; 同时对圆二色性光谱获得的结构信息, 采用按照Chen2Yang 原理和最小二乘法编写的程序计算了冬小麦麸皮抗冻蛋白的二级结构。最后, 讨论了两种检测方法结果差异的原因, 为冬小麦麸皮抗冻蛋白抗冻机理的研究奠定基础。
     抗冻蛋白是一种具有降低体系冰点、抑制体系发生重结晶作用的蛋白质, 其独特的特性是与其结构密不可分的[1 ] 。在前文的研究中, 本课题组从冬小麦中筛选获得抗冻蛋白TaAFP[2 ] , 但是对其结构和抗冻机理还知之甚少。为了进一步研究TaAFP 的抗冻机理, 本文对TaAFP 的二级结构进行了研究, 通过对TaAFP 二级结构的解析, 可以为从理论上解释TaAFP 与冰晶结合的方式与结合位点奠定基础, 有效地揭示TaAFP 的抗冻机理。
    光谱技术是研究生物蛋白质构象与功能关系的一种有效途径, 其中圆二色光谱(CD) 可以灵敏地反映出蛋白质构象的变化, 已被广泛应用于蛋白质的构象研究中[3 , 4 ] 。傅里叶变换红外光谱( FTIR) 属于振动光谱, 主要研究分子间能级的跃迁, 是依据被检测样品中某一化学成分在近红外光谱区的吸收特性不同而进行定量检测的一种无损、非破坏的绿色分析方法[5 , 6 ] 。通过测定样品酰胺Ⅰ带和Ⅲ带构象中α2he2lix ,β2sheet ,β2turn 和Random coil 的相对含量, 最终获得样品的二级结构信息[5 , 729 ] 。本文结合使用CD 和FTIR 光谱的两种测定方法, 最终确定了TaAFP 的二级结构信息。
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