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关键词：
微生物,高温酵母,紫外线诱变,耐受能力
发表时间：
2012-10-15 12:26:24
摘要： 建立了利用HPLC-ELSD 测定木质纤维素原料预处理后水解液中主要糖的成分葡萄糖和木糖含量的方法。实验条件优化得出在漂移管温度为90℃，流动相为乙腈∶水（70∶30），流速为1mL/min，氮气流速为2.0 L/min条件下，经Shodex Asahipak NH2P-50(4.6 m×250 mm,5 μm)色谱柱后，可以将水解液中的主要糖成分葡萄糖和木糖进行良好的分离。结果表明，葡萄糖在0.0094～110 mg/mL 范围内，木糖在0.031～62.34 mg/mL 内标准曲线相关系数均为0.999，精密度高(以木糖和葡萄糖的相对标准偏差分别为0.54 %和0.66 %)。该方法具有简洁、快速、准确、重现性好的特点。
随着石油资源的日益枯竭，粮食的日益紧张，以及对乙醇、丁醇等为主的液体燃料和其他生物质化工产品（乳酸、丁二酸等）的巨大需求，促使以木质纤维素为原料生产可发酵性糖， 然后生物转化生物化工产品的研究与开发成为中国、美国等世界耗能大国的科学界和产业界的热点[1]。在木质纤维素的生物加工过程的研究中，首先要搞清楚它在糖化前后的组成。木质纤维素主要由纤维素、半纤维素和木质素3 种成分组成。其中纤维素是由D-六环葡萄糖经β-1，4 糖苷键联结而成的直链多糖。半纤维素是许多不同的单糖聚合的杂多糖，包括葡萄糖、木糖、甘露糖、阿拉伯糖和半乳糖等，主要成分为木糖。
传统的测糖方法主要是DNS 法，其原理是利用糖的还原性，最终得到的是总还原糖的含量，不利于对木质纤维素中的原料做出准确的评价。因此，目前主要是利用高效液相测定糖的含量， 其检测方法主要有示差法和蒸发光散射法两种。关于示差法有部分文献报道[2]。该方法对检测柱温要求高，一般在60～80℃。而蒸发光散射检测柱温度一般在室温下即可进行。蒸发光散射检测器
（ELSD） 的原理[3]主要是经色谱柱分离的洗脱液与氮气混合形成均匀的微小液滴， 经过加热的漂移管后， 流动相被蒸发，剩下雾状的微小颗粒，经光的照射后，发生散射，产生信号。
吕颖等人利用反相液相色谱-蒸发光散射测定了药物中的葡萄糖胺[4]；魏炀[5]等人利用二醇基柱高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定饮料中的糖；Pamita Bhandari等利用HPLC-ELSD 测定胡黄连中的糖的种类和含量[6]；蔡欣欣等利用HPLC-ELSD 测定了食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖和麦芽糖的含量[7]；而采用该方法测定木质纤维素水解前后的糖的方法尚不多见。本文利用Waters 公司提供的高效液相仪器采用HPLC-ELSD 对木质纤维素的预处理前后糖的变化进行了测定分析，得出较好的测定葡萄糖和木糖的液相分离条件， 为木质纤维素的糖化效率和预处理方法提供评价的依据。
传统的测糖方法主要是DNS 法，其原理是利用糖的还原性，最终得到的是总还原糖的含量，不利于对木质纤维素中的原料做出准确的评价。因此，目前主要是利用高效液相测定糖的含量， 其检测方法主要有示差法和蒸发光散射法两种。关于示差法有部分文献报道[2]。该方法对检测柱温要求高，一般在60～80℃。而蒸发光散射检测柱温度一般在室温下即可进行。蒸发光散射检测器
（ELSD） 的原理[3]主要是经色谱柱分离的洗脱液与氮气混合形成均匀的微小液滴， 经过加热的漂移管后， 流动相被蒸发，剩下雾状的微小颗粒，经光的照射后，发生散射，产生信号。
吕颖等人利用反相液相色谱-蒸发光散射测定了药物中的葡萄糖胺[4]；魏炀[5]等人利用二醇基柱高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定饮料中的糖；Pamita Bhandari等利用HPLC-ELSD 测定胡黄连中的糖的种类和含量[6]；蔡欣欣等利用HPLC-ELSD 测定了食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖和麦芽糖的含量[7]；而采用该方法测定木质纤维素水解前后的糖的方法尚不多见。本文利用Waters 公司提供的高效液相仪器采用HPLC-ELSD 对木质纤维素的预处理前后糖的变化进行了测定分析，得出较好的测定葡萄糖和木糖的液相分离条件， 为木质纤维素的糖化效率和预处理方法提供评价的依据。
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