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关键词：
酒精,甲醇,杂醇油,精馏塔,稀释塔
发表时间：
2012-12-14 11:25:40
摘要: 本研究采用斑马鱼胚胎模型研究力达霉素在整体动物水平对血管生成的影响。力达霉素处理胚胎后,利用形态学观察、血管染色法、转基因斑马鱼检测其对胚胎血管生成影响, 以荧光定量PCR 和蛋白免疫印迹法检测VEGF 基因的表达情况。结果显示: 力达霉素处理后, 胚胎出现心包水肿、血流速度减缓等症状; 血管生长率降低, 肠下静脉生成受到抑制。荧光定量PCR 和蛋白免疫印迹检测表明, 力达霉素对胚胎的VEGF mRNA 表达水平没有影响, 但VEGF 蛋白的表达受到显著抑制。研究结果表明, 力达霉素可以下调VEGF 蛋白表达, 从而抑制斑马鱼胚胎血管生成。
血管生成是肿瘤生长、发展的必经之路, 与实体瘤的发生、转移有着密切的关系。这一多步骤的复杂过程受多种因素影响, 其中, VEGF (vascular endothelial growth factor, VEGF) 作为主要的血管生成因子在血管生成中发挥着重要作用。多种以血管生成为靶点的抗肿瘤药物如 Endostatin、Avastin 等已进入临床应用, 并获得了良好的疗效[1]。
斑马鱼作为一种重要的模式生物, 具有胚胎透明、操作简单、生长同步和繁殖速度快等特点, 被广泛用于胚胎的分子发育机制、疾病模型的构建以及药物筛选等研究中。斑马鱼作为疾病分析和新药研发方面细胞分析和啮齿动物分析的中间模型[2], 与小鼠等动物模型相比具有简便、快速的特点。抗血管生成药物的研究方法包括人脐静脉内皮细胞的体外研究技术、鸡胚尿囊膜技术以及微血管密度实验等。斑马鱼作为抗血管生成药物的研究模型具有快速、准确并可以进行定量分析的优点。将绿色荧光蛋白基因插入flk1 基因启动子序列构建转基因斑马鱼, 利用荧光显微镜可方便观察斑马鱼血管生成的变化[3]。近年来采用斑马鱼模型研究抗血管生成药物已有大量报道,作者前期亦研究了斑马鱼VEGF 的调控机制[4]。此外作者采用斑马鱼模型由海洋生物中获得了多种具有抗血管生成作用的抗肿瘤成分, 并采用人脐静脉内皮细胞实验证实这些前体药物具有显著的抗血管生成作用[5, 6]。
斑马鱼作为一种重要的模式生物, 具有胚胎透明、操作简单、生长同步和繁殖速度快等特点, 被广泛用于胚胎的分子发育机制、疾病模型的构建以及药物筛选等研究中。斑马鱼作为疾病分析和新药研发方面细胞分析和啮齿动物分析的中间模型[2], 与小鼠等动物模型相比具有简便、快速的特点。抗血管生成药物的研究方法包括人脐静脉内皮细胞的体外研究技术、鸡胚尿囊膜技术以及微血管密度实验等。斑马鱼作为抗血管生成药物的研究模型具有快速、准确并可以进行定量分析的优点。将绿色荧光蛋白基因插入flk1 基因启动子序列构建转基因斑马鱼, 利用荧光显微镜可方便观察斑马鱼血管生成的变化[3]。近年来采用斑马鱼模型研究抗血管生成药物已有大量报道,作者前期亦研究了斑马鱼VEGF 的调控机制[4]。此外作者采用斑马鱼模型由海洋生物中获得了多种具有抗血管生成作用的抗肿瘤成分, 并采用人脐静脉内皮细胞实验证实这些前体药物具有显著的抗血管生成作用[5, 6]。
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