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关键词：
胞外分泌物,天然有机物,混凝,藻,高岭土
发表时间：
2012-08-15 20:25:06
摘要: 采用白腐真菌组合培养的方式提高漆酶酶活, 并对组合后菌株相互作用机制进行了研究. 菌株55( Tram etes trogii)和菌株m-6(Tram etes versico lor) 组合后漆酶酶活较菌株55和m-6分别提高了241 13倍和4107 倍; 组合后菌株间不存在抑制作用;平板培养时, 两菌株菌丝生长止于菌丝交界处, 该处漆酶酶活最高并分泌褐色色素; 液体培养时, 菌株m-6对组合后漆酶酶活的提高起着更为重要的作用: 向菌株55的培养物中添加菌块m-6, 其酶活比向菌株m-6 培养物中添加菌块55时的酶活高71 03倍, 并且菌株m-6胞外物对菌株55的漆酶分泌也有明显的刺激作用, 其中加入20 mL过滤灭菌胞外物可使菌株55漆酶酶活提高61 79倍, 而且胞外物高温灭菌后仍能刺激菌株55的漆酶分泌, 加入20mL后酶活比对照高4160倍; Na tive-PAGE活性染色结果表明组合后同工酶种类未发生变化, 但有3种同工酶的浓度升高.
漆酶( laccase, EC1. 10. 3. 2)是一种含铜的酚氧化酶, 能降解各种酚类化合物[ 1~ 3] , 在适宜的介质存在时亦能催化非酚类物质[ 4, 5 ] , 因此被广泛应用于污染物降解、生物制浆、印染脱色等领域. 自然界中白腐真菌是漆酶的主要生产者, 并且大部分白腐真菌都能分泌漆酶, 酶活较高的种属有T ram etes versicolor、Coriolus versicolor、L entinus edodes、Pycnoporus等.
正是由于漆酶有着如此广泛的用途, 于是大幅提高漆酶酶活成为目前研究的一个重要方向. 许多学者在提高漆酶酶活方面做了不少研究, 如采用紫外诱变[ 6] , 添加金属诱导剂CuSO[ 7]
4 , 添加芳香族或酚类化合物2, 2c-连氮基-双-( 3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸) 二铵盐( ABTS ) [ 8] 、2, 5-二甲基苯胺( DMA ) [ 9] 等. 但是由于紫外诱变其操作较为繁琐,而漆酶诱导物往往是些重金属或有毒有机物, 会对环境造成污染, 有学者将白腐真菌和真菌或细菌进行组合, 通过菌株之间的相互作用来提高漆酶酶活,相比而言, 这种方法更为简便, 同时安全环保. 目前研究主要集中在白腐真菌与褐腐真菌、霉菌、土壤微生物组合[ 10~ 15] , 但是将白腐真菌和白腐真菌进行组合研究则较少.
本实验采用将白腐真菌进行组合的方式提高漆酶酶活, 并分别从平板培养、液体培养以及组合前后漆酶同工酶的变化情况等方面着手对组合后菌株相互作用机制进行研究, 以期为白腐真菌组合提高漆酶的方法提供理论依据.
正是由于漆酶有着如此广泛的用途, 于是大幅提高漆酶酶活成为目前研究的一个重要方向. 许多学者在提高漆酶酶活方面做了不少研究, 如采用紫外诱变[ 6] , 添加金属诱导剂CuSO[ 7]
4 , 添加芳香族或酚类化合物2, 2c-连氮基-双-( 3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸) 二铵盐( ABTS ) [ 8] 、2, 5-二甲基苯胺( DMA ) [ 9] 等. 但是由于紫外诱变其操作较为繁琐,而漆酶诱导物往往是些重金属或有毒有机物, 会对环境造成污染, 有学者将白腐真菌和真菌或细菌进行组合, 通过菌株之间的相互作用来提高漆酶酶活,相比而言, 这种方法更为简便, 同时安全环保. 目前研究主要集中在白腐真菌与褐腐真菌、霉菌、土壤微生物组合[ 10~ 15] , 但是将白腐真菌和白腐真菌进行组合研究则较少.
本实验采用将白腐真菌进行组合的方式提高漆酶酶活, 并分别从平板培养、液体培养以及组合前后漆酶同工酶的变化情况等方面着手对组合后菌株相互作用机制进行研究, 以期为白腐真菌组合提高漆酶的方法提供理论依据.
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