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关键词：
高效液相色谱法,柳叶水甘草碱,伏康树籽,含量
发表时间：
2012-02-23 11:26:30
摘要: 目的从鸡肝中提取3 － 脱氧葡萄糖醛酮( 3 － DG) 还原酶，并建立3 － DG 还原酶体外反应体系筛选药物。方法以辅酶NADPH 的消耗量为评价指标来表示3 － DG 还原酶的活性，通过对反应体系底物3 － DG、辅酶NADPH、酶量和反应时间的优化，考察温度等影响因素，建立3 － DG 还原酶体外反应体系并应用于寻找提高3 － DG 还原酶活性的药物。结果优化后的反应体系为: 100 μg·mL － 1 3 － DG 溶液、250 μg·mL － 1 NADPH、酶液各20 μL，用50 mmol·L － 1 的Na2HPO4 － NaH2PO4缓冲液( pH6． 4) 调反应体系至200 μL，混合物于37 ℃反应40 min; 以NADPH 的消耗量来定义3 － DG 还原酶的酶活单位，并应用于17 种药物的筛选。结论该反应体系可用辅酶NADPH 的消耗来反映体系中3 － DG 还原酶的活性，并能为寻找提高3 － DG代谢酶活性的药物提供方法。
－ 脱氧葡萄糖醛酮( 3 － deoxyglucosone，3 －DG) 为二羰基类化合物，在衰老、糖尿病、尿毒症等疾病的发生发展中起着重要的作用［1］。在正常人的体内，3－ DG 可在其代谢酶的作用下，生成无生物活性的3 － 脱氧果糖和3 － 脱氧葡萄糖醛酸，随尿液排出体外，维持体内3 － DG 较低水平( ng 级) 的正常生理平衡［2］。而在糖尿病及尿毒症患者的血清中，3－ DG 含量要比正常人高3 ～ 5 倍［3］，这可能与这些患者的3 － DG 代谢酶系统代谢能力下降有关［4 － 5］。现从鸡肝中提取得到了3 － DG 还原酶，并建立了3 － DG 还原酶的体外反应体系，为寻找提高3 － DG 代谢酶活性的药物提供了方法。
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