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关键词：
精确质量数GC-TOF质谱仪,代谢组学,应用
发表时间：
2013-01-28 09:38:01
摘 要 对比研究了假单胞菌M-6及其细胞内外提取液对微囊藻毒素-LR(MCLR)的降解效率. 结果表明,细胞外提取液对藻毒素没有降解作用, 胞内酶粗提液能在24h内降解MCLR, 日均MCLR降解率是纯菌株M-6的41 7倍. 进而研究了酶蛋白浓度、底物MCLR浓度、pH 值及环境温度对胞内酶粗提液降解藻毒素效率的影响. 当MCLR浓度为151 0m g# l- 1时, MCLR适宜的酶促降解反应条件为: 酶蛋白浓度280m g# l- 1,温度为30e , 反应pH 值为710. MCLR液相色谱结构变化图表明, 至少有3种酶参与了胞内酶粗提液降解M CLR 的分子过程.
微囊藻毒素(MC s)是一类在蓝藻水华中出现频率最高、造成危害最严重的藻毒素, 其中微囊藻毒
素-LR (MCLR )是我国和世界上检出频率及含量都最高的MCs类型[ 1] . 已有许多研究表明微囊藻毒素
对动物和人类都具有明显的毒性效应[ 2] , 因而MC s对人和动物的饮用水安全、以及水生态系统的稳
定均已构成威胁.
目前对微生物降解MCLR的研究主要集中在高效菌种的筛选及其降解效能的提高上, 如Ho 等[ 3]
从生物砂滤池中分离出1株具有降解MCLR 和MCLA 能力的鞘氨醇单胞菌( Sphingom onas LH21) .V aleria等[ 4] 从水库中分离出鞘氨醇单胞菌( Sphingomonas sp CBA4)可快速降解MCRR. Takenaka等[ 5]发现从湖泊表层水体分离出的铜绿假单胞菌(P seudomonas aerugino sa )对MCs有降解能力, 其分泌的碱性蛋白酶主要负责催化降解MCLR. Kato等[ 6] 研究了菌株B-9的细胞内水解酶对MC s的降解发现, 水解酶可以破坏MC s的环七肽结构. 但对菌株所分泌的酶是如何通过酶促反应来降解藻毒素的研究还不多.
本文在课题组前期研究基础上[ 7 ] , 以福州市某富营养化水库的底泥为菌株来源, 筛选出高效降解藻毒素的假单胞菌M-6为研究对象, 研究该菌种无细胞提取液降解MCLR 的酶促反应以及温度、pH
值和底物浓度对该酶促反应的影响, 并对酶促降解反应的机理进行初探, 以期为后续提取高效藻毒素
降解酶和构造基因工程菌提供依据.
素-LR (MCLR )是我国和世界上检出频率及含量都最高的MCs类型[ 1] . 已有许多研究表明微囊藻毒素
对动物和人类都具有明显的毒性效应[ 2] , 因而MC s对人和动物的饮用水安全、以及水生态系统的稳
定均已构成威胁.
目前对微生物降解MCLR的研究主要集中在高效菌种的筛选及其降解效能的提高上, 如Ho 等[ 3]
从生物砂滤池中分离出1株具有降解MCLR 和MCLA 能力的鞘氨醇单胞菌( Sphingom onas LH21) .V aleria等[ 4] 从水库中分离出鞘氨醇单胞菌( Sphingomonas sp CBA4)可快速降解MCRR. Takenaka等[ 5]发现从湖泊表层水体分离出的铜绿假单胞菌(P seudomonas aerugino sa )对MCs有降解能力, 其分泌的碱性蛋白酶主要负责催化降解MCLR. Kato等[ 6] 研究了菌株B-9的细胞内水解酶对MC s的降解发现, 水解酶可以破坏MC s的环七肽结构. 但对菌株所分泌的酶是如何通过酶促反应来降解藻毒素的研究还不多.
本文在课题组前期研究基础上[ 7 ] , 以福州市某富营养化水库的底泥为菌株来源, 筛选出高效降解藻毒素的假单胞菌M-6为研究对象, 研究该菌种无细胞提取液降解MCLR 的酶促反应以及温度、pH
值和底物浓度对该酶促反应的影响, 并对酶促降解反应的机理进行初探, 以期为后续提取高效藻毒素
降解酶和构造基因工程菌提供依据.
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