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关键词：
板蓝根颗粒,质量控制,生物测定,凝集活性,血红细胞
发表时间：
2012-07-25 10:56:48
基于环氧合酶抑制作用的人工麝香质量评价方法研究
李泽浩 | -> | 1422| 0| 0.78633MB |人工麝香,环氧合酶-2,酶免疫测定,抗炎,生物评价
摘要: 采用酶免疫 (EIA) 法, 测定和计算人工麝香对环氧合酶Ⅱ (COX-2) 的抑制率, 构建人工麝香对COX-2 抑制作用的量效关系, 为建立人工麝香的体外抗炎效价测定方法提供研究基础。结果显示, 人工麝香对COX-2 具有明显抑制作用, 半数抑制浓度 (IC50) 为2.26 mg·mL−1, 在0.31～20.0 mg·mL−1内, 具有明显的量效关系。结果表明, 该方法快速、灵敏、准确、重现性好, 可用于建立人工麝香抗炎生物效价检测方法, 同时本文也为人工麝香的生物活性评价提供了新的研究思路和方法。
麝香是我国传统珍稀名贵中药之一, 疗效确切,常用于治疗疮疡肿毒、咽喉肿痛、跌打损伤等症[1]。由于药材来源依靠猎麝取香, 野生麝资源极为短缺,麝香的药源严重匮乏, 价格昂贵。为此, 我国自主研制了人工麝香 (artificial musk, AM) 作为天然麝香代用品, 人工麝香具有与天然麝香相似的药理作用和生物活性[2]。目前, 对于天然麝香的质量控制主要是测定其中麝香酮的含量; 而对于人工麝香, 因其配方复杂, 其中麝香酮为人工添加, 则主要采用常规药理实验方法对其进行质量评价[3, 4]。常规药理实验周期长、样品耗量大且精确度和可量化程度均不高, 因此需要建立一种多、快、好、省的麝香质量控制与评价方法。当前, 建立与药效相关的中药质量生物评价模式和质量控制方法已经成为中药质量控制研究和发展的趋势[5, 6]。2010 版《中国药典》的编写大纲中曾明确指出: 中药的质量标准要逐步由单一指标成分定性定量测定向活性有效成分及生物测定的综合检测过渡。
因此, 对于中药麝香, 优选和建立适宜的生物效价检测方法用于其质量控制和品质评价是对以指标性成分检测为主的质控模式的有益补充, 同时也为麝香品质评价和质量控制标准的建立和完善提供参考。本文以人工麝香为研究对象, 探讨通过生物效价建立其质量评价方法。
麝香具有开窍醒神、消肿止痛、活血调经等功效,抗炎作用是其实现消肿止痛功效的共同途径[7, 8]。目前主要采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型、角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型等常规药理方法对药物的抗炎活性进行评价, 但用于贵重药材人工麝香抗炎活性评价存在一定的局限性, 如耗费动物、实验周期长、样品耗量大、成本较高、干扰因素多、重现性较差等。现代研究[9]表明, 环氧合酶 (cyclooxygenase,COX) 通路是麝香发挥抗炎作用的机制之一。COX至少有两种亚型: COX-1, 存在于大多数组织细胞中,其异构酶COX-2 是一种诱导酶, 仅存在于多种刺激因子如脂多糖 (LPS) 和细胞因子等引起的炎症组织中[10, 11], 是许多抗炎药物的主要作用靶点, 测定COX-2 抑制效应可用于评价药物抗炎活性[12−14]。COX-2 抑制活性的测定, 目前普遍采用的是放射免疫法 (RIA) 或酶免疫法 (EIA) 测定COX-2 催化花生四烯酸 (AA) 生成前列腺素 (PGs) 的量的变化[15]。与RIA 相比, EIA 法由于便捷、稳定、经济、安全而较为常用[16, 17]。EIA 法用于药物的抗炎活性评价, 具有快速、灵敏、准确、影响因素少、重现性好的特点。
本文采用EIA 法, 探讨通过测定人工麝香作用后的COX-2 催化花生四烯酸生成前列腺素量的变化,
研究人工麝香对COX-2 的抑制作用, 构建人工麝香对COX-2 抑制作用的量效关系, 以期为建立人工麝
香抗炎作用的生物效价检测方法提供新的研究思路和方法。
因此, 对于中药麝香, 优选和建立适宜的生物效价检测方法用于其质量控制和品质评价是对以指标性成分检测为主的质控模式的有益补充, 同时也为麝香品质评价和质量控制标准的建立和完善提供参考。本文以人工麝香为研究对象, 探讨通过生物效价建立其质量评价方法。
麝香具有开窍醒神、消肿止痛、活血调经等功效,抗炎作用是其实现消肿止痛功效的共同途径[7, 8]。目前主要采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型、角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型等常规药理方法对药物的抗炎活性进行评价, 但用于贵重药材人工麝香抗炎活性评价存在一定的局限性, 如耗费动物、实验周期长、样品耗量大、成本较高、干扰因素多、重现性较差等。现代研究[9]表明, 环氧合酶 (cyclooxygenase,COX) 通路是麝香发挥抗炎作用的机制之一。COX至少有两种亚型: COX-1, 存在于大多数组织细胞中,其异构酶COX-2 是一种诱导酶, 仅存在于多种刺激因子如脂多糖 (LPS) 和细胞因子等引起的炎症组织中[10, 11], 是许多抗炎药物的主要作用靶点, 测定COX-2 抑制效应可用于评价药物抗炎活性[12−14]。COX-2 抑制活性的测定, 目前普遍采用的是放射免疫法 (RIA) 或酶免疫法 (EIA) 测定COX-2 催化花生四烯酸 (AA) 生成前列腺素 (PGs) 的量的变化[15]。与RIA 相比, EIA 法由于便捷、稳定、经济、安全而较为常用[16, 17]。EIA 法用于药物的抗炎活性评价, 具有快速、灵敏、准确、影响因素少、重现性好的特点。
本文采用EIA 法, 探讨通过测定人工麝香作用后的COX-2 催化花生四烯酸生成前列腺素量的变化,
研究人工麝香对COX-2 的抑制作用, 构建人工麝香对COX-2 抑制作用的量效关系, 以期为建立人工麝
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