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关键词：
啤酒生产,脱氧雪腐镰刀菌烯醇,变化情况,高级醇,α-氨基氮,风味
发表时间：
2012-10-16 09:12:18
摘要： 通过研究菌龄、菌体预处理、渗透压稳定剂及含有不同渗稳剂的再生平板等不同因素对酿酒酵母1450 原生质体制备的影响，确定了其原生质体制备的条件：菌龄为6 h，预处理剂为PB+0.1 %EDTANa2+3 % β-巯基乙醇，采用1 mol/L 山梨醇为渗透压稳定剂，再生培养基添加0.5 mol/L 蔗糖为稳定剂，在此条件下，其原生质体形成率达99.85 %，再生率达14.31 %。
原生质体融合技术于20 世纪50 年代开始被研究并逐步应用于微生物育种领域，因其不受亲缘关系、能够克服遗传障碍、实现远源杂交等特殊优势，迅速成为工业微生物遗传育种的重要方法之一[1～5]，尤其在酵母育种工作中，自1977 年匈牙利人Sipiczki 与Ferenczy 首次实现酵母菌的原生质体融合以来， 国内外微生物育种工作者广泛利用原生质体融合技术开展种（内）间或属（内）间酵母原生质体融合的研究， 而且细胞重组子应用于实际生产中也获得了良好的效果[6～11]。
原生质体的形成与再生是融合的基础与前提， 不同菌株的原生质体制备条件差异较大， 不同因素对相同菌株原生质体形成与再生的影响也各不相同， 通过改良和优化菌株原生质体制备条件， 能够获得较高的原生质体形成率和再生率， 是保证融合育种效率的首要条件。目前，有关酿酒酵母原生质体制备的研究很多，但对于有关渗透压稳定剂对其原生质体制备影响的报道尚不多见。本研究为得到一株既能酒精发酵又能苹果酸-乳酸发酵的新型降酸酵母菌株， 在酿酒酵母与酒酒球菌原生质体融合之前，通过研究菌龄、菌体预处理、渗透压稳定剂及含有不同渗稳剂的再生平板等不同因素对优良酿酒酵母原生质体制备的影响，确定其原生质体形成及再生条件，以保障进一步提高融合效率， 实现跨界融合筛选高效降酸菌株的研究提供理论与应用基础。
原生质体的形成与再生是融合的基础与前提， 不同菌株的原生质体制备条件差异较大， 不同因素对相同菌株原生质体形成与再生的影响也各不相同， 通过改良和优化菌株原生质体制备条件， 能够获得较高的原生质体形成率和再生率， 是保证融合育种效率的首要条件。目前，有关酿酒酵母原生质体制备的研究很多，但对于有关渗透压稳定剂对其原生质体制备影响的报道尚不多见。本研究为得到一株既能酒精发酵又能苹果酸-乳酸发酵的新型降酸酵母菌株， 在酿酒酵母与酒酒球菌原生质体融合之前，通过研究菌龄、菌体预处理、渗透压稳定剂及含有不同渗稳剂的再生平板等不同因素对优良酿酒酵母原生质体制备的影响，确定其原生质体形成及再生条件，以保障进一步提高融合效率， 实现跨界融合筛选高效降酸菌株的研究提供理论与应用基础。
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