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关键词：
传统白酒,现代白酒,发展前景
发表时间：
2012-12-26 10:30:11
淫羊藿次苷_促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨性分化过程中iNOS活性和NO生成量的变
王歆平 | -> | 1373| 0| 1.939409MB |淫羊藿次苷II,骨髓间充质干细胞.成骨性分化.诱导性一氧化氮合酶,一氧化氮
摘要: 研究淫羊藿次苷II (icariside II, ICS II) 对大鼠体外培养骨髓间充质干细胞 (rat bone marrow stromalcells, rBMSCs) 成骨性分化过程中诱导性一氧化氮合酶 (induced nitric oxide synthase, iNOS) 表达及NO 生成的影响。贴壁筛选法体外培养rBMSCs, 待铺满80% 皿底时, 进行成骨性诱导培养, 同时采用1×10−5 mol·L−1 ICS II进行药物干预, 比较ICS II 组、L-NAME 组、ICS II + L-NAME 组和不加药的对照组之间的iNOS 的活性、NO生成量, 对比各组之间的成骨性指标, 包括碱性磷酸酶活性、碱性磷酸酶阳性克隆数 (CFU-FALP) 及钙化结节数量。提取总RNA, 实时荧光定量RCR (real-time PCR) 检测Osterix (OSX)、Runx-2 及iNOS mRNA 的表达情况; 同时提取总蛋白, Western blotting 法检测Ⅰ型胶原蛋白和iNOS 的分泌量。ICS II 可显著增强碱性磷酸酶 (ALP) 活性, 增加钙化结节和CFU-FALP 数量, 与成骨性分化相关的因子OSX 和Runx-2 的基因表达量也显著升高, 同时I 型胶原的分泌量也明显增多, 但这些效应均可被iNOS 的特异性抑制剂L-NAME 所抑制。ICS II 可显著促进rBMSCs 的成骨性分化, 但采用L-NAME 进行阻断后, 随着iNOS 和NO 表达的降低, 成骨性分化的指标随之降低, 提示ICS II 是通过提高iNOS 活性, 促进NO 的生成来刺激rBMSCs 的成骨性分化的。
淫羊藿是小檗科淫羊藿属多种植物的干燥地上部分, 具有补肾壮阳、强筋健骨之功效, 是中医治疗骨质疏松方剂中使用频率最高的中草药之一[1, 2]。淫羊藿的主要化学成分是黄酮类化合物, 尤以淫羊藿苷 (icariin, ICA) 的含量最高。陈克明等[3−6]报道,ICA可抑制体外培养破骨细胞的骨吸收活性, 促进骨髓间充质干细胞的成骨性分化。ICA 常通过口服方式给药, 经肠道细菌分解会产生多种代谢产物, 其中最主要的代谢产物为淫羊藿次苷II (icariside II, ICSII)[7, 8]。作者的前期研究表明, 此代谢产物的促骨形成活性高于原药, 应是ICA 在其体内发挥生理活性的主要形式[9], 结构式见图1。关于ICA 的作用机制,许多人认为是植物雌激素样作用, 作者采用ICS II 的研究结果表明, 在rBMSCs 的成骨性分化过程中,ICA 的体内代谢产物ICS II 可以提高iNOS 的活性,促进NO 的生成, 从而激活NO 信号途径, 此应是其主要作用机制之一。
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