基于滑移芯片的双浓度梯度反应阵列_鄢兴华

宋丹杨 | -> | 395| 0| 2.293696MB |微流控;滑移芯片;双浓度梯度;a伴乳糖普酶

宋丹杨 宋丹杨 | 文档量 |浏览量232106

    生命科学的飞速发展对高通量分析技术提出了更迫切的要求。阵列技术以其规模化有序集成的操
作方式成为当前高通量技术代表。微流控芯片是近年发展起来的新概念分析技术,以其微型化、集成化
和自动化等优点备受瞩目。将微流控芯片技术与阵列技术结合,即阵列微流控芯片或微流控阵列芯片
己成为芯片分析的最重要方向之一,广泛应用于生物医学分析。阵列式的微反应器越来越被研究人员
重视,各种阵列形成方式得到广泛尝试与验证,如液滴阵列[D.zl、微孔阵列[Cs - s7、电极阵列[Cpl磁珠阵
列[Ll等,并实际应用于基因组学、蛋白质组学,甚至细胞、组织等分析,如RT PCR}B"'0} ,DNA甲基化分
析[00、单分子酶的测定[o z}、细胞培养[[I3-IS]、胚胎研究[[I6, 17]、单细胞研究[[I S -20]、病毒检测与基因分
型[[21, 22]等。
    滑移芯片是Ismagilov研究组提出的一种新微反应阵列平台。这种组合芯片通过两块芯片之间的
相对滑动实现指定通道和孔的接通与断开,从而实现样品和反应物的进样、混合、洗脱及反应等功能。
该研究组采用滑移芯片实现了单种样品和多种试剂的多路同时反应[Czs, zal,在此基础上进一步实现了蛋
白质结晶条件筛选[Cz3.zsl `PCR}zb.z}l、免疫测定[2A]、细菌培养[29]等高通量分析。
    浓度梯度是实现多路高通量反应的方式之一,可以减少多浓度试剂需求实验中的样品准备时间,并
且更加精确和易于调整。微流控芯片可以形成精确的浓度梯度,且通过改变网络通道的构型设计及初
始液流的浓度和组合顺序,可获得一系列复杂的浓度梯度。在芯片上形成双浓度梯度的难点在于每种
浓度梯度的形成需要一个独立不受干扰的区域或平面,而两种试剂的混合可能会造成流体的互相干扰
和通道的互相影响。Hung等[30]在垂直交叉的芯片通道交叉处用阀的开关控制流体方向,可使两个方
向的试剂分别形成浓度梯度,但同时形成两种浓度梯度仍有困难。滑移芯片为解决同一平面的两种浓
度梯度互相干扰的情况提供了全新思路,即通过两块不同平面的芯片分别形成浓度梯度,再通过芯片滑
移操作将两种浓度梯度的试剂进行接触混合反应。两种浓度梯度同时形成,且互不影响,形成后也能
使不同浓度的两种试剂以正交的形式交叉反应。
    本研究发展了一种基于滑移芯片的双浓度梯度反应阵列平台,可通过简单的样品注入,同时形成两
种试剂的名7尺平的浓度梯度,并将其以正交的方式相互接触与混合,形成正交浓度的微反应阵列,从而
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