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关键词：
生物碱,测定,
发表时间：
2010-11-24 10:24:20
摘 要:目的 检测附子离体培养愈伤组织和离体苗的生物碱量,建立附子乌头类总生物碱和同时测定新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的分析方法。方法 用酸性染料比色法测定乌头类总生物碱的量;反相高效液相色谱法测定新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的量,色谱柱为Zorbax extend-C18 (150 mm ×4.6 mm ,5 μm) ,流动相为乙腈2011 %乙二胺,梯度洗脱,体积流量为1 mL/ min ,检测波长为240 nm ,柱温30 ℃。结果 愈伤组织和离体苗中总生物碱的量分别为3.972 、2.904 mg/ g ;新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的量分别为: 0.678 、0.448 、0.887 mg/ g ,0.464 、0.234 、0.339 mg/ g。3 种生物碱得到很好分离,线性关系良好。结论 愈伤组织中生物碱的量高于离体苗,该方法快速简便、灵敏准确、回收率高,可以为附子质量控制提供科学依据。
附子是我国常用的中药和四川道地药材[ 1 ] ,为毛茛科乌头A coni t um carmichael i Debx1 的子根。附子的主要有效成分为乌头类生物碱: 乌头碱(aconitine) 、新乌头碱(mesaconitine) 与次乌头碱(hypaconitine) 等,具有抗炎、镇痛、强心、抗心律失常、降血糖等药理作用,回阳救逆、补火助阳、散寒除湿的功效,近年来现代药理学研究证明,附子提取液还具有抗癌、抗衰老和增强免疫功能等作用[1～3 ] 。附子离体培养克服了人工栽培中耗种量大,容易感染病毒,种性退化等缺点。但是在人们过去的研究中侧重于组培条件的优化和驯化种植上,对离体培养中生物碱量的测定,特别是3 种主要的双酯型生物碱量的测定国内外还较少报道。本实验测定附子离体苗中生物碱的量,为附子的离体培养,评价和控制附子的质量提供科学依据。
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