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FTIR_HATR诊断_地中海贫血及其机理研究

雨泽 | -> | 626| 0| 0.515928MB |傅里叶红外光谱,水平衰减全反射,地中海贫血,磷脂,2,3-二磷酸甘油酸

雨泽 雨泽 | 文档量 |浏览量11590

摘 要 为建立简单快速的地中海贫血(简称地贫)诊断方法, 探讨了傅里叶红外光谱结合水平衰减全反射( FTIR2HATR)技术用于β2地贫患者的检测及其分子机制。检测了68份正常与37份β2重型地贫患者样品,并在群体水平上分析了两者光谱差异变化规律。结果显示: (1)由于血红蛋白量的减少, β2地贫组的光谱强度显著低于正常组; (2)在1 750~1 500 cm - 1区间, 表征蛋白二级结构的1 652, 1 638和1 628 cm - 1在β2地贫中有明显降低, 而在1 682 cm - 1处略微增强; (3)在1 350~1 500 cm - 1区间, 表征磷脂CH3 /CH2 的1 440,1 453, 1 479 cm- 1及CO—O—C的1 172和1 161 cm - 1吸收峰在β2地贫中显著减少; 而在1 000~1 200 cm- 1区间, 表征碳水化合物C—O的1 150 cm- 1 , 2, 32二磷酸甘油酸(DPG)或ATP中O P O 的1 081和1 053cm - 1吸收峰显著升高。统计表明DPG/脂类比在β2重型地贫组中显著高于正常组, 并可作为诊断指标, 将两者完全区分, 避免了复杂数据处理过程, 为地贫的光谱诊断提供了坚实的实验基础与理论依据。
    地中海贫血(简称地贫)是我国南部地区常见的一种遗传性血液疾病, 主要分为α2地贫与β2地贫两种类型[ 125 ]。其中, β2地贫是由于β2珠蛋白基因突变, 珠蛋白链合成受到抑制所致。在临床上可根据β2珠蛋白减少程度, 分为静止型、轻型、中间型与重型[ 1 ]。其中, β2重型地贫多见于β2地贫纯合子患者, 是诸多类型中贫血症状最为严重的一种, 患者在出生后3~6个月便表现临床症状, 需定期输血维持生命。到目前为止, 筛查与产前诊断是降低β2重型地贫的发病率及减少患者数量的主要途径。
    在地贫的诊断中, 通常以血常规、形态学、生化检验、蛋白电泳方法作为主要诊断依据, 辅助以基因诊断或高效液相法[ 6 ]实施确诊, 其程序繁锁, 诊断周期较长。近几年, 随着光谱技术的发展, 傅里叶变换红外光谱( FTIR)已广泛应用于生物复杂体系的研究之中[ 7-11 ]。更因为实时、快速、无损的检测特点, 可在分子水平反映物质的组成、结构及数量关系, FTIR已成为医学诊断中富有潜力诊断工具。目前, 红外光谱诊断癌症[ 12-15 ]、白血病[ 16, 17 ]、血糖[ 18, 19 ]等已有众多成功的报道。在地贫研究中, L iu等[ 20 ]使用红外透射法, 检测了成膜在CaF2 窗片的血红蛋白( hemoglobin, Hb)溶液。通过光谱数据的优化, 基于敏感的光谱区间, 线性判别分析可实现对β2重型地贫与正常组的有效诊断。但在该区间, 差异的变化及诊断的分子机理并未清楚, 而且复杂的数据预处理也同样桎梏了光谱对地贫的快速诊断。为阐述β2地贫与正常组光谱间的变化规律及其分子机理, FTIR结合水平衰减全反射( horizontal attenuated total reflectance, HATR)技术用于
β2地贫研究中, 本文详实地探讨了β2地贫与正常组的光谱差异及其机理, 并为β2地贫的诊断提供了简单可靠的定量指标及依据, 使FTIR用于β2地贫大规模筛选成为可能。
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