近几年, 在我国的许多葡萄产区相继出现病害症状: 新梢生长缓慢, 萎黄, 着生的叶子带有卷曲或者变色, 多年生主干发病部位呈灰褐色或紫褐色坏死,变硬。且已有大量葡萄坏死, 对葡萄园的产量造成很大的经济损失。根据病状, 我们怀疑为葡萄顶枯病( EutypaDieback) 。为此对病原菌进行分离、培养、分子鉴定, 以期为病害的发现和防治提供依据。
葡萄顶枯病是一种严重的腐烂性病害。直到1973年, 澳大利亚的科学家才确定这种病害是由子囊菌门,弯孢壳属的Eutypa armeniaca Hansf.and M.V.Cater 引起的, 其后更名为Eutypa lata (Pers.) Tul. & C. Tul[1]。近年来, 许多学者的研究表明与Eutypa lata 同属或者近属关
系的真菌也能造成葡萄顶枯病的症状[2, 3]。美国、新西兰、希腊、法国、澳大利亚和瑞士都相继报道了此病害的发病情况。
因葡萄顶枯病主导病原菌Eutypa lata 菌丝生长慢、易被其他腐生菌覆盖、人工培养不易产生有性世代, 所以利用形态学鉴定十分困难。近年来, 大量的分子生物学方法运用到病害鉴定中, 大大提高了鉴定的速度和准确性。2000 年, Pascal Lecomte 等人利用特异引物对病原菌Eutypa lata 进行快速PCR 扩增鉴定[4]。其后P.E.Rolshausen 等人在2004 年利用PCR- RFLP 方法对其进行了补充, 更能精确地鉴定主导病原菌Eutypa lata 及相近属的差异性[2]。本文应用了PCR、PCR- RFLP 以及DNA 测序对国内病株进行了研究。
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