超高效液相色谱_串联质谱法检测畜_省略_中3_甲基喹口恶啉_2_羧酸残留_吕海鸾

摘要: 以猪肉、猪肝、猪肾、胖头鱼、对虾和蟹为试验材料，建立了喹乙醇( OLA) 的残留标示物3-甲基喹口恶啉-2-羧酸( MQCA) 残留的超高效液相色谱-串联质谱( UPLC-MS /MS) 检测方法。采用0. 2 mol /L 盐酸提取可食性组织中的分析物，经C18 固相萃取小柱净化、35 ℃氮气吹干及含0. 1%( v /v) 甲酸的乙腈溶解后，采用超高效液相色谱分离，串联质谱法确证和定量分析。质谱检测采取正离子多反应监测模式，外标法定量。结果表明: MQCA 在2 ～ 500μg /L 范围内呈良好的线性关系，各组织中的相关系数( r2 ) 均大于0. 990; 猪肉、猪肝、猪肾、鱼、对虾和蟹中MQCA的检出限依次为0. 90、1. 51、0. 94、1. 04、1. 62 和1. 80 μg /kg，定量限依次为3. 00、5. 02、3. 13、3. 46、5. 40、6. 00μg /kg。从3 ～ 100 μg /kg 的添加浓度的检测结果可以看出，MQCA 的平均回收率均在73. 6% 与89. 0% 之间，日内相对标准偏差( RSD，n = 5) 在15%以下，日间RSD( n = 3) 为20%以下。该方法的灵敏度、准确度和精密度均符合兽药残留分析技术的要求，适用于动物组织中MQCA 残留的定量分析和确证检测。

    喹乙醇( olaquindox ，OLA) 属于喹口恶啉类药物，是一种理想的兽药和饲料添加剂，具有抗菌与蛋白质同化作用，兼有促进生长作用［1］。研究表明，喹乙醇及其代谢物具有光敏毒性［2］、遗传毒性［3］、致突变性、致癌作用、生态毒性［4，5］等毒性作用。过量使用喹乙醇会造成蓄积，蓄积浓度过高时就会危害到动物机体的健康，同时也对人类的健康造成极大的负面影响。欧盟已于1999 年禁止了在食品动物生产中使用喹乙醇作为促生长添加剂［6］; 《中国
兽药典》( 2005 版) 也有明确规定，喹乙醇被禁止用于家禽及水产养殖。喹乙醇本身不稳定，在动物体内能够短时间内代谢成十多种产物，其中3-甲基喹口恶啉-2-羧酸( MQCA) 是主要代谢物之一，其在体内相对稳定。国际联合国粮农组织( FAO) /世界卫生组织( WHO) 食品添加剂联合专家委员会( JECFA)于1995 年将MQCA 定为喹乙醇在动物体内代谢的残留标示物。2003 年我国农业部规定肌肉和肝脏组织中MQCA 的最大残留限量分别为4 μg /kg 和50 μg /kg。目前，在我国喹乙醇仍然作为抗菌促生长添加剂被广泛使用［7］。因此，研究建立喹乙醇残留标示物3-甲基喹口恶啉-2-羧酸的残留检测技术具有重要意义。
    目前有关MQCA 残留检测方法比较多，如高效液相色谱法( HPLC ) 、高效液相色谱-紫外光谱( HPLC-UV) ［8］、气相色谱-质谱联用( GC-MS ) ［9］、液相色谱-串联质谱联用( LC-MS /MS) ［10， 11］、实时定量聚合酶链式反应( PCR) ［12］、免疫分析法等。这些方法一般都是先水解、再过固相萃取柱净化后检测，并且普遍存在检出限高，回收率较低，操作繁琐和耗时长的缺点［13］。与一般的HPLC 相比，超高效液相色谱( UPLC) 是最近新发展的技术，它有分辨率更高、反应更灵敏、分析速度更快等特点［14 － 16］。因此，我们拟采用UPLC-MS /MS 分析方法，建立简单、准确、高效的残留检测技术，能够极大地缩减其前处理过程和仪器分析过程中所需的时间，同时分析猪肉、猪肝、猪肾、鱼、虾和蟹中MQCA 残留，以适用于对多品种、大批量样品的残留监控检测。