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关键词：
风格流派,浓香型白酒,枝江大曲酒,风格,分析
发表时间：
2013-01-21 16:39:01
以四磺基铝酞菁_牛血清白蛋白为底物的荧光恢复均相法测定胃蛋白酶
韩伟东 | -> | 896| 0| 0.310016MB |荧光探针,酞菁,胃蛋白酶,荧光恢复,红外区荧光
摘要酸性介质中，红区荧光探针四磺基铝酞菁( AlS4Pc) 的荧光被白蛋白显著猝灭，加入胃蛋白酶后，体系荧光明显回复。基于此现象，建立了荧光恢复均相测定胃蛋白酶的新方法。考察了各种影响因素，在最佳实验条件( pH 2． 5、反应温度50 ℃、反应时间1 h) 下，本方法的线性范围为0． 04 ～ 4 mg /L，检出限为20 μg /L。用本方法测定实际样品中胃蛋白酶，取得了满意的结果。
胃蛋白酶( Pepsin) 是一种消化性蛋白酶，在酸性环境中具有较高活性［1，2］，其最适宜pH 值为1． 5 ～3． 0。胃蛋白酶原( Pepsinogen，PG) 是胃蛋白酶的无活性的前体，血液中PG 含量可作为胃基底膜功能和病理改变的理想标志物［3］，可应用于萎缩性胃炎和胃癌早期预防。胃蛋白酶的检测方法有: 酶联免疫吸附测定( ELISA) ［4，5］，它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定，反应产物可用分光光度计或酶标仪测定，测定灵敏度为5 ～ 10 mg /L; 考马斯亮蓝染色法［6，7］，采用染料与蛋白结合在595 nm 处光吸收的增加量得到与其结合的蛋白质量，可检测出1 mg /L 蛋白质; 火箭免疫电泳法( RIE) ［8］是将单向免疫扩散与电泳相结合的一项定量检测技术，检测灵敏度可达0． 3 mg /L。
荧光探针在生物大分子检测中得到广泛应用［9］。例如，陈莉华等［10］用CdSe 量子点作标记物检测人胃液中的胃蛋白酶。四磺基铝酞菁( Aluminium tetrasulphonated phthalocyanine，AlS4Pc) 是一种红区荧光探针，具有荧光性质稳定、量子产率高等特点。酸性介质中，AlS4Pc 可与牛血清白蛋白( Bovine serum albumin，BSA) 结合，荧光显著猝灭［11， 12］。在酸性条件，于AlS4Pc-BSA 体系中加入胃蛋白酶，体系的荧光显著恢复。基于此现象，本研究建立了胃蛋白酶荧光均相定量分析方法，并对其机理进行了探讨。
荧光探针在生物大分子检测中得到广泛应用［9］。例如，陈莉华等［10］用CdSe 量子点作标记物检测人胃液中的胃蛋白酶。四磺基铝酞菁( Aluminium tetrasulphonated phthalocyanine，AlS4Pc) 是一种红区荧光探针，具有荧光性质稳定、量子产率高等特点。酸性介质中，AlS4Pc 可与牛血清白蛋白( Bovine serum albumin，BSA) 结合，荧光显著猝灭［11， 12］。在酸性条件，于AlS4Pc-BSA 体系中加入胃蛋白酶，体系的荧光显著恢复。基于此现象，本研究建立了胃蛋白酶荧光均相定量分析方法，并对其机理进行了探讨。
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