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关键词：
海洋天然产物化学,海洋药物,最新进展
发表时间：
2013-08-13 11:35:32
聚乙烯亚胺-DNA复合物的形成和聚集行为研究
贾佳 | -> | 550| 0| 2.36755MB |PEI/DNA复合物,过渡态,聚集,静电作用力,疏水作用力,转染
摘要: 聚乙烯亚胺 (polyethyleneimine，PEI) 是一种优良的非病毒基因传输载体材料，本文对PEI/DNA 复合物粒子的形成机制进行了初步探讨，电泳阻滞实验和紫外测定实验表明, 复合物的形成过程中存在着某种过渡状态即珠串样结构，透射电镜的结果提供了相应的例证。此外通过离子强度实验，作者认为在PEI 与DNA 的复合过程尽管以静电作用为主要作用力，同时也可能存在着其他类型的非静电作用力。PEI/DNA 复合物粒子的表面电荷随着N/P 的增加逐步增加，但由于DNA 的分子质量较大，在N/P 为8 和12 时表面电荷的绝对值较小,容易聚集成葡萄串样聚集体，离子强度实验表明该聚集过程的支配作用力可能是疏水作用力。PEI/DNA 复合物在N/P 为12 时的细胞转染效果与阳性对照组相当，表明聚集的PEI/DNA 复合物也具有一定的细胞转染能力。
基因治疗是最终解决因基因变异所引发疾病的首选策略[1]。在基因治疗的具体实施过程中，基因传输载体的选择至关重要。1995 年, Boussif 等[2, 3]首次报道了聚乙烯亚胺 polyethyleneimine，PEI) 可作为一种优良的多功能非病毒载体，具有较好的细胞黏附性，可不依赖于溶酶体抑制剂而转染细胞，它已经成为非病毒载体设计的一个“黄金对照准则”。但载有DNA 的非病毒基因传输系统是一个非常复杂的体系，从体外制备到胞内传输直至基因表达需要克服多重生理学屏障[4, 5]，近年来, 研究者已经找到了多种非病毒载体[6, 7]，并对影响基因传输过程的许多因素进行了考察[6, 8], 其中研究非病毒载体/DNA 复合物的形成机制以及复合物粒子的稳定性行为是一个非常重要的领域，它与非病毒载体以及DNA 自身的结构特性密切相关, 并直接影响复合物体内的摄取过程和转染效果[9]。本文设计了一系列实验，考察了从PEI/DNA 粒子的复合过程到粒子形成后的聚集行为及其对细胞转染结果的影响，并进行了初步的机制探讨，阐述了复合物的形成和聚集之间存在着一定的前后关联。
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