应用圆二色光谱研究电场对辣根过氧化物酶二级结构的影响

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摘 要 辣根过氧化物酶( HRP) 经不同强度的电场处理, 用圆二色光谱研究了电场对辣根过氧化物酶二级
结构的影响。结果表明: 在110~610 kV ·cm- 1范围, 不同强度的电场对辣根过氧化物酶的α2螺旋、β2折叠、β2转角及无规卷曲相对含量的影响程度不同。与对照组相比, 处理组的α2螺旋、β2转角和无规卷曲含量降低,降幅范围分别为013 %~1114 % , 117 %~1513 %和019 %~2014 %; β2折叠含量增加, 增幅范围为019 %~8217 %。电场作用具有使辣根过氧化物酶的二级结构中α2螺旋、β2转角和无规卷曲向β2折叠转化的趋势。研究结果对解释电场处理种子生物效应具有重要意义。
    人们对物理因素(包括力学、电、磁、温度、光和离子束等) 对植物体的影响做了许多工作, 已积累了大量宏观实验资料[125 ] 。已有研究表明, 电场处理植物种子能明显改善种子的发芽势、发芽率、根长、芽长及鲜重和产质量等表观特性[628 ] , 且不同电场强度对种子的萌发和幼苗生长的影响也不同[9 , 10 ] 。还有研究证明电场处理植物种子具有提高种子抗逆能力等作用[11-13 ] 。但是, 有关电场作用于生物系统的什么成分, 特别是电场对生物体处理的原初作用机理基本没有报道。在一定程度上, 这已成为目前制约电场生物效应开发研究的主要因素。
    过氧化物酶[peroxidase , 简称POD , EC 11111117 (X) ]是一类氧化由过氧化氢参与的各种外源物的血红素酶[14 ] 。迄今研究最深入的是植物辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase , HRP) [15 ] 。它的晶体结构已获知[16 ] , 其活性中心主要催化残基是His42 , Arg38 , His170[17 , 18 ] 。
    光谱技术是研究生物蛋白质构象与功能关系的一种有效途径, 其中圆二色(circulardichroism , 简写为CD) 光谱可以灵敏地反映出蛋白质构象的变化, 已被广泛应用于蛋白质的构象研究中[19 ,20 ] 。本文应用圆二色光谱研究了不同电场强度对辣根过氧化物酶二级结构的影响, 为进一步研究电场处理植物种子的宏观生物效应作用机理提供一定的理论依据。
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