掌叶大黄细胞悬浮系统和根培养系统对鬼臼毒素的生物转化研究

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摘 要: 目的 对鬼臼毒素的生物转化进行研究。方法 利用掌叶大黄细胞悬浮系统和根培养系统进行生物转化。采用色谱技术和波谱手段对转化产物进行分离鉴定。结果 加入鬼臼毒素对掌叶大黄细胞悬浮系统和根培养系统的pH值无明显影响; 两种组培系统均能转化鬼臼毒素。在本实验条件下, 细胞悬浮系统使7318% 的鬼臼毒素发生了转化,根培养系统中使5613% 的鬼臼毒素发生了转化。两种系统对鬼臼毒素的转化产物不同, 前者只转化生成鬼臼苦素, 后者转化生成表鬼臼毒素等多种化合物。结论 掌叶大黄细胞悬浮系统和根培养系统均能有效转化鬼臼毒素。
    生物转化是利用生物体系将加入到生物反应系统中的外源有机底物某一特定部位或功能基团进行
特异性的结构修饰, 以获得有价值的不同化学产物的工艺[1 ]。用植物细胞悬浮培养物对外源底物进行生物转化从而对其结构进行修饰, 以获得更有意义的产物报道很多[2~ 4 ]。目前已知离体培养植物细胞具有酯化、氧化、葡萄糖基化、异构化、甲基化、去甲基化、乙酰化等多种生物转化能力[5 ]。它具有反应选择性强、反应条件温和、副产物少、不造成环境污染和后处理简单以及可以进行传统有机合成所不能或很难进行的化学反应等优点, 因此有着较大的理论及实际应用价值。利用生物转化的这些特点, 对资源丰富、量较高却又未得到充分利用的天然化合物和部分人工合成的活性化合物进行生物转化, 可以从中找到有开发价值的新的活性先导化合物及其可能的生产方法, 因此有着较大的理论及实际应用价值。
    鬼臼毒素及相关木脂素是一类具有显著细胞毒性的天然活性物质, 这类物质主要来自鬼臼属植物,统称为鬼臼类木脂素。其化学结构皆具有2, 3-丁内酯-4-芳基四氢萘的母核。20 世纪40 年代证实鬼臼毒素具有抗癌活性, 但由于其毒副作用大, 限制了临床的直接应用[6 ]。多年以来, 为获得高活性、低毒的鬼臼衍生物, 科研工作者对鬼臼类木脂素的结构改造做了大量工作, 其中也包括生物转化法的应用[7~ 10 ]。本实验利用掌叶大黄R heum p a lm a tum L 1 细胞悬浮系统和根培养系统对鬼臼毒素进行了生物转化研究, 试图确定其转化情况及其相关转化产物, 为鬼臼类结构修饰探索新途径, 同时对掌叶大黄不同培养系统的生物转化能力和特点进行比较研究, 为寻找可能的可用于生物转化的酶系统做基础性探索。
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