2_2_7H_二苯并_a_g_咔唑_乙氧基_省略_甲酸酯对脂肪胺类化合物的荧光标

摘　要　利用新型荧光标记试剂22[ 22(7H2二苯并[ a, g]咔唑2乙氧基) 2乙基氯甲酸酯作为柱前衍生化试剂,在Eclip se XDB2C8 反相色谱柱上,采用梯度洗脱,实现了12种脂肪胺类化合物完全基线分离。检测最佳激发和发射波长分别为300和400 nm。通过荧光检测及离子阱大气压化学电离源(APCI Source)正离子模式实现了在线的柱后质谱鉴定。对土壤中脂肪胺类化合物的测定快速、准确,具有良好的重现性。荧光定量检测的回归系数大于0. 9991; 检出限为10. 1～0. 3 fmol。
关键词　液相色谱2质谱, 荧光标记, 柱前衍生, 脂肪胺
　1　引　言
脂肪胺广泛分布于自然界中, 因其毒性大、反应活性高而在环境监测和食品安全检测中备受关注。
快速准确地测定胺类化合物对环境化学、生物学、毒物学和临床医学具有重要意义。脂肪胺类化合物通
常无紫外吸收(或者仅有弱的紫外吸收) , 也不具备荧光发光性质, 因此进行化学衍生是提高该类化合
物检测灵敏度的有效途径。高效液相色谱荧光衍生化中,广泛应用的衍生试剂主要有邻苯二甲醛
(OPA) [ 1～3 ] 、42氯272硝基苯并21, 2, 32噁二唑(NBD2Cl) [ 4 ] 、12二甲氨基萘252磺酰氯(DNS2Cl) [ 5 ] 、芴甲氧
羰基氯( FMOC2Cl) [ 6, 7 ]和62氨基喹啉基2N2琥珀酰亚胺碳酸酯(AQC) [ 8, 9 ] 。这些衍生试剂在实际应用中
都存在一些缺陷,例如OPA只与伯胺反应且重现性和相应衍生物的稳定性较差; NBD2Cl试剂在水溶液
中的稳定性较差, 见光容易分解; DNS2Cl除稳定性差外, 衍生物伴有荧光猝灭现象,造成检测灵敏度下
降; FMOC2Cl衍生化需要经过萃取处理消除过量试剂的干扰, 操作过程繁琐且易造成疏水衍生物的丢
失; AQC在水中的量子效率很低, 不利于梯度洗脱。因此研制开发高灵敏且价廉的发光材料用于它们
的测定,十分必要。
多环含氮杂原子的化合物通常显示出较强的光致发光特性[ 10, 11 ] , 含咔唑母体环类的衍生物则为其
中的一类, 该类化合物在本实验室中得到较好的应用[ 12～14 ] 。在此基础上, 本实验合成了新型荧光衍
生试剂22[ 22(7H2二苯并[ a, g]咔唑2乙氧基) 2乙基氯甲酸酯(DBCEC2Cl) ,其分子内含1个氮杂原子并
具有五环并联的高共轭体系。与先前制备四环并联的共轭体系BCEC2Cl[ 15 ]相比,具有更强烈的光致发
光性质。与同类试剂相比,衍生化简便、快速, 衍生物稳定性好, 具有较高的检测灵敏度和较宽的线性
范围。对实际土壤样品中游离脂肪胺的测定结果满意。