pH和铜离子对微囊藻毒素_LR荧光免疫检测的影响与消除

马晓敏 | -> | 1575| 1| 0.174919MB |微囊藻毒素-LR,铜离子,荧光免疫检测,倏逝波,光纤免疫传感器

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摘要: 研究了pH 和铜离子对倏逝波全光纤免疫传感器检测微囊藻毒素- LR(MC-LR) 的影响及其消除措施. 研究表明, 过酸或过碱条件对MC- LR 免疫检测均有较强烈的影响, 当pH< 6 或pH> 8 时, 系统检测的信号随pH 的降低或增大明显下降; 而当pH在6~ 8 之间时, 检测标准曲线的IC50 为1101~ 1104 LgPL, 检测区间在0112~ 1015 LgPL之间, 较适合MC-LR 的检测. 低浓度铜离子对MC-LR 免疫检测的影响不大, 当CuSO4 浓度> 5 mgPL时, 系统检测荧光信号明显下降, 而当CuSO4 浓度达到10 mgPL时, 系统检测信号下降70%以上. 在预反应混合物中添加1%的螯合剂EDTA, 能有效抑制铜离子对免疫检测的影响.
    基质效应是荧光免疫传感器应用于实际样品检测中所面临的重要问题. 所谓的基质效应是指样品
中除分析物以外的其它成分对分析物测定值的影响或基质对分析方法准确测定分析物能力的干扰[ 1, 2] ,如pH、温度、重金属离子、颗粒物、有机物等. 在使用荧光免疫传感器进行环境水样检测过程中, 由于水体基质成分复杂, 对免疫检测将产生不同程度的影响, 但目前对这方面的研究还鲜见报道[ 3~ 5] .
    本研究以微囊藻毒素-LR( microcystin-LR, MCLR)为检测对象, 探讨pH 和重金属离子等因素对荧
光免疫检测的影响. MC-LR 是富营养化水体中最普遍、急性毒性最强的一种藻毒素. 文献[ 6, 7] 均将其限制浓度定为1 LgPL. 由于富营养化水体往往含有多种重金属, 如汞、铜、锌、铅、镉、铬等. 这类金属在水环境中的环境行为表现出价态变化多、配位络合能力强、生物毒性效应明显等特点, 可能使一些蛋白质及酶的活性降低; 某些溶解性的有机物如蛋白、氨基酸等也可以作为重金属离子的配位体, 与重金属离子结合在一起. 因此, 水体中存在的重金属离子将不可避免地对荧光免疫检测产生一定的影响.
    硫酸铜溶液常用来做除藻剂, 在富营养化水体中可能含量较多, 因此, 本研究选用铜离子作为重金属离子的代表, 利用自行研制的倏逝波全光纤免疫传感器, 考察不同铜离子浓度对荧光免疫检测的影响及其消除措施. 另一方面, 也研究了pH 值对倏逝波全光纤免疫传感器检测MC-LR 的影响.
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