基于顺序注射分析法的丝网印刷型生物传感器系统的研究

李玉洁 | -> | 1256| 0| 1.861799MB |顺序注射分析,生物传感器,丝网印刷电极,辣根过氧化物酶

李玉洁 李玉洁 | 文档量 |浏览量37253

摘􀀁 要􀀁 采用顺序注射分析( SIA) 与丝网印刷生物传感器联用法, 考察辣根过氧化物酶( H RP) 催化邻苯二胺( OPD)􀀁H 2O2 反应体系。利用牛血清白蛋白( BSA) 和戊二醛形成的交联大分子, 将HRP 固定于丝网印刷电极表面, 制备成H RP 电极, 通过对缓冲液pH 值及浓度、泵流速、样品量进行优化, 建立用于检测H RP 对H2O2 与OPD 的催化动态响应曲线的SIA 与时间􀀁电流( i􀀁t ) 相结合的分析方法。结果表明: 在实验反应的最适条件( 泵流速153. 9 mL/ min、样品量100 mL、0 . 1 mol/ L PBS 缓冲液( pH 6. 5) ) 下, 电流响应值随H 2O2 浓度增加而增大, H RP 酶电极测定H 2O2 的浓度线性范围是0. 1~ 1. 0 mmo l/ L, 呈现良好的线性关系。该酶电极重现性良好, RSD 为3. 8%, 用于实际水样回收率测定时, 回收率大于60%。
    丝网印刷型电化学生物传感器具有成本低, 工艺简单, 检测快速, 灵敏度高等特点[ 1~ 3] 。在应用分析中通常将样品滴加到这类电极的工作区域或直接把电极放入样品液中。近来出现了流动注射分析( FIA) 与丝网印刷生物传感器联用技术。如Ledr u 等[ 1] 采用FIA 与电化学丝网印刷电极结合检测HRP􀀁SPCE 与H2 O2 体系间电子直接转移, 该方法提高了传感器分析的精确度和灵敏度。为了提供多步骤化学反应, 简化分析流路操作, 在实际应用的在线和过程分析工作中, 顺序注射分析( SIA) 和电化学生物传感器联用技术得到了关注。如Gomes 等[ 4] 采用SIA 与铂电极电化学生物传感器结合检测L􀀁乳酸;Niculescu 等[ 5] 采用喷壁式FIA 和SIA 与石墨棒及丝网印刷脱氢酶电极结合监测酒发酵过程中的乙醇。与FIA 相比, SIA 检测系统中泵阀到检测器间管道较短, 消耗试剂较少[ 6] , 可通过注射泵定量抽吸实现多步骤的定量反应与分析[ 6~ 8] , 且不需要因为检测项目变化而改变流路系统。SIA 与丝网印刷型电化学生物传感器联用方法, 提供了更有利的在线长期实时检测环境[ 5, 6] 。目前对该联用方法使用研究还较少。本实验采用此联用方法, 以辣根过氧化物酶( HRP) 为生物识别分子,探讨丝网印刷电极上HRP 酶催化邻苯二胺( OPD) 􀀁H2O2 体系[ 9~ 11] 的反应, 并优化了检测条件。
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