反相高效液相色谱法测定食品中_氨基丁酸的研究

张璐 | -> | 1560| 7| 0.232781MB |γ -氨基丁酸,反相高效液相色谱,正亮氨酸

张璐 张璐 | 文档量 |浏览量64832

[摘要] 目的: 建立反相- HPLC 法测定食品中γ - 氨基丁酸( GABA) 的测定方法。方法: 用正亮氨酸作为内标物,样品中的γ - 氨基丁酸和正亮氨酸与2,4二硝基氟苯( FDNB) 反应转化成稳定的衍生物并用乙醚萃取,挥发后,残余物溶解在NaOH 溶液中,处理液注入反相- HPLC 中,用甲醇溶液在盐酸缓冲液中线性梯度洗脱,于400 nm 处检测。结果: GABA、正亮氨酸分别和FDNB 反应60 min 后达到平衡,流出液检测峰位分别在45 min 和60 min。GABA 在1 ng /ml ~ 100 ng /ml范围内具有良好的线性,其相关系数大于0. 999,检出限为1 ng /ml,实际样品加标回收率为98. 4 ± 2.3%。结论: 此方法简单、准确,用于实际样品检测,结果满意。
    γ - 氨基丁酸( GABA) 是中枢神经系统中很重要的抑制性神经递质,它是一种天然存在的非蛋白组成的氨基酸,具有极其重要的生理功能。能够促进脑的活化性,健脑益智,抗癫痫,促睡眠,美容润肤,延缓脑衰老机制,降低血压,促进肾机能改善和保护作用,抑制脂肪肝和肥胖症,活化肝功能。近年来,富含γ - 氨基丁酸( GABA) 的功能食品有了很大的发展。因此,发展和评估含有GABA 的功能性食品,简单有效的定量分析食品中所含的GABA 是很重要的。目前检测GABA 的方法有分光光度法[2]和改良纸层析法[1]等,由于GABA 在紫外光区和可见光区及荧光区没有显著的吸收,需要被转化成在UV 或可见光区及荧光区有强吸收的物质来测定,天然产品中又含有其它能被紫外或荧光吸收的物质可能干扰吸收,因此需要用高效液相色谱( HPLC) 分离天然产品中的干扰物质,这种方法还只能在特定的实验室使用氨基酸分析仪来测定,易受检测条件限制。因此本文研究利用GABA 与FDNB 反应生成稳定的衍生物,在普通的HPLC 条件下检测食品中的GABA。
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