头发纤维表面半胱氨酸的荧光光谱分析

董振兵 | -> | 2074| 4| 0.388206MB |头发纤维,半胱氨酸,7-氯-4-硝基苯-2-口恶-1,3-二唑,荧光光谱法

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摘 要 环境中许多物理或化学因素可破坏头发角蛋白主要构成成分胱氨酸, 使其结构中二硫键发生断裂转为带巯基的半胱氨酸, 半胱氨酸的含量可作为头发受损程度的评价依据。本文采用可与半胱氨酸反应的荧光探针试剂7-氯-4-硝基苯-2-口恶-1, 3-二唑( NBD-Cl) , 与头发纤维表面半胱氨酸反应并进行荧光光谱分析, 探讨了反应的影响因素。结果显示, NBD-Cl 可与头发表面的半胱氨酸残基反应, 反应产物具有荧光性。对实验条件进行了优化, 发现pH4. 5 为较适宜的反应酸度, 此时NBD-Cl 与半胱氨酸的巯基和氨基均可反应, 表现为头发表面荧光强度较高。
    环境中许多物理或化学因素可破坏头发角蛋白主要构成成分胱氨酸, 使其结构中二硫键发生断裂转为带巯基的半胱氨酸[ 1] 。例如, 长时间的日光曝晒, 基于化学药品处理的染发或烫发等。角蛋白化学性质的改变, 反映在头发纤维即机械强度下降, 梳理性变差。因此头发角蛋白二硫键断裂的情况一直被作为头发受损程度的评价依据。汞溴红着色法、铜吸附法通过测定巯基表征头发的损伤, 然而灵敏度较低。本文应用对蛋白质巯基敏感的荧光探针试剂NBD-Cl[ 2] 直接标定头发表面巯基, 以期获得损伤情况下头发纤维表面化学性质改变的信息。
    NBD-Cl 是稳定的无荧光淡黄色固体, 易溶于有机溶剂。NBD-Cl 可作为氨基化合物的荧光衍生试剂, 它与其他亲核试剂特别是与巯基反应产生弱的荧光[ 3] 。文献报道NBD-Cl 与蛋白质中巯基, 氨基、酪氨酸羟基反应并在一定区域内产生弱的荧光。通过改变介质的pH 值, 使其与不同的基团反应,因而具有较大的应用范围[ 4, 5] 。
    本文拟采用市售冷烫精处理头发纤维, 研究NBD-Cl 与胱氨酸二硫键断裂后产生的含巯基半胱氨酸的反应条件。
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