工作站上设置全波长，跑一次，然后在工作站上看，哪个波段有最大吸收
注意：用紫外扫描确定样品的吸收光谱，溶解样品的溶剂最好在所选的波长范围内没吸收或吸收强度比较弱。另外，HPLC测定波长并不一定要选样品的最大吸收波长，有时要选其特征吸收波长。尤其是在最大吸收和特征吸收不重合时，根据具体情况也可以选特征吸收波长作为检测波长。此外，如果样品无明显吸收或吸收强度较低，建议取较低波长（如在215 nm或更低），一般在此波长下被测组分的吸收相对较强，被检出的组分也较多。在定量分析中，同时还要考虑样品基质（例如制剂）、样品杂质的影响。基质和溶剂在所选的波长处应没有吸收，而杂质如没有吸收，肯定影响定量结果的准确度。
第一种方法，就是选择单一检测波长，也是使用最多的一种方法，这种方法要考虑多方面的因素，首先要考虑药物本身的紫外吸收，其次要考察药物合成中所用到的原料和中间体，另外还要注意药物中所有的各种杂质，包括合成副产物、药物的降解产物等，综合这些所有的因素，选择一个大家吸收系数都差不多的检测波长作为样品的有关物质的检测波长；如果一些杂质的吸收系数与主成分的吸收系数相差比较大的时候，可以加一个校正因子，或者用杂质对照品作为外表法检查杂质。
这种方法应用最为广泛，在目前的药品标准中大约占到90%以上。
第二种方法，就是用单波长检测同时加参比波长的方法，适用于一些制剂中辅料干扰样品的检测，以及一些其他中药和溶剂对样品检测有干扰的时候，这种方法要求检测单位必须配备二极管阵列检测器，这种方法引用虽然很少，但也是作为波长选择方法的一个很好的补充。
第三种方法，也就是选用双波长检测，同时选择两个检测波长，每个检测波长下的结果都要达到一定的限度，这种方法也要求检测单位必须配备二极管阵列检测器或者多波长检测器，这种方法适用于复方制剂、以及样品中的杂质与主成分无法找到一个共有的紫外吸收波长。
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