C18色谱柱 换 硅胶正相色谱柱的 步骤
一、 液谱仪上连接的是C18色谱柱，用纯甲醇（色谱级）以1.0ml/min的流速，冲10~20分钟，然后将C18色谱柱从仪器上卸下来。
二、 不要安装色谱柱在仪器上，用纯异丙醇（色谱级）以1.0ml/min的流速，冲10分钟。一般10分钟后压力基本稳定，如果不稳定就要延长冲洗时间直到压力稳定后再进行下一步。（在这期间控拨进样器3次）
三、 换用正己烷（色谱级）以2.0ml/min的流速，冲20分钟。（在这期间控拨进样器3次）
四、 将 硅胶正相色谱柱 安装在液谱仪上，继续用正己烷（色谱级）以2.0ml/min的流速，冲10分钟。
五、 换所需分析样品的流动相，以2.0ml/min的流速，直到基线稳定后，方可进样。
以上所有步骤中，每次换流动相时都必须排气泡。
各位同仁磨刀不误砍柴工，心急吃不了热豆腐，换柱子时耐心点！
硅胶和水会产生不可逆吸附(硅胶在水里水解，变成水玻璃了)，一旦发生后，色谱柱的分离性能会发生很大变化。所以硅胶正相色谱柱是不能用水的，而且流动相在使用的时候也最好做脱水处理，比如放些分析筛吸附流动相中的水。这样才能延长硅胶色谱柱的使用寿命，希望你能好好保护他。稍不小心就有可能报废。
所以千万不能让带有水的流动相进入到正相色谱柱中
正相换反相，就随便点了。用异丙醇过渡下，就可以换反相流动相用了。
反相色谱系统切换成正相系统并不是简单地用正相流动相冲洗就可以完成的事情。首先，大多数情况下，需要更换色谱柱，因为正相填料和反相填料有较大的差别。例如：反相填料大多是C18或C8烷基键合相，而正相的填料则大多为硅胶。
反相流动相里一般都含有水分，而正相色谱柱很忌讳用水，绝大部分正相流动相都不与水互溶。虽然有的文献里正相流动相加少量的水，但是一般不建议这样做。因此，在反相改为正相时，要彻底冲洗系统。如果反相的流动相有盐，要先用水洗，然后依次用甲醇－异丙醇，过度到正相流动相后再接正相色谱柱。正相切换到反相则可以采取相反的步骤。如果正相的流动相与反相互溶的话，可以直接用。
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