|
方法名称： |
枸杞子-甜菜碱-HPLC |
|
应用范围： |
作为枸杞子中甜菜碱的定量测定方法。 |
|
方法原理： |
本品细粉加5%乙腈超声提取，经液相色谱分离，在192nm处测定峰面积，外标法计算含量 |
|
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 LC-10AT vp型输液泵(日本岛津公司)； SDP210A vp型检测器(日本岛津公司)； N2000双通道色谱工作站 色谱条件 色谱柱Hypersil SCX柱(250 mm ×4. 6 mm， 5. 0μm，大连依利特) 流动相为乙腈20.05 mol·L-1磷酸二氢钾2磷酸(15∶85∶0.18)；检测波长为192 nm；柱温: 30℃；流速: 1 ml·min- 1 |
|
试样制备： |
对照品溶液的制备 取甜菜碱对照品适量，精密称定，
用水溶解并制成每1 ml含80μg的溶液，即得 供试品溶液的制备 取枸杞子剪碎， 取约1g，精密称定，加80%甲醇50 ml，加热回流1 h，放冷，滤过，用80%甲醇溶液30 ml分次洗涤残渣和滤器，合并洗液和滤液，蒸干，残渣加0.1 mol·L-1盐酸溶液10ml使溶解，加入活性炭1g，置水浴中加热2 min，边加热边搅拌，放冷，滤过，用0.1mol/L盐酸15ml分次洗涤烧杯和滤器，合并洗液和滤液，加入新配制的2. 5%硫氰酸铬铵溶液20ml，搅拌均匀，置冰浴中放置3h。用G4垂熔漏斗滤过，沉淀用少量冰水(约10ml)洗涤，抽干，残渣用丙酮15ml分次溶解并抽干，在丙酮液中滴加0.5%硫酸银溶液(约5ml)至不再有沉淀产生，放置，滤过，用70%乙醇20ml分次洗涤沉淀和容器，合并洗液和滤液，置水浴上浓缩至约1ml，放冷，加入与硫酸银等当量的1%氯化钡溶液(约1.7ml)，蒸干，残渣加水适量使溶解，转移至50ml量瓶中并用水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液用0.45μm滤过，作为供试品溶液 |
|
操作步骤： |
在选定的色谱条件下，分别吸取对照品和供试品溶液各10μl进样，测定峰面积值，按外标法计算含量 |
评论