断血流皂苷A血浆浓度的自动柱切换高效液相色谱法测定

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    断血流皂苷A(clinopodisideA)为中药断血流的主要成分,具有止血功效[1],属于齐墩果烷型三萜皂苷类,含量较高,且化学性质稳定柱切换技术采用切换阀连接2根或2根以上相同或不同分离机理的色谱柱,通过改变流动相走向,在前一根色谱柱完成被测组份与干扰杂质的分离,达到纯化与富集的目的,在随后的色谱柱完成被测组份的测定因此,该技术可实现对复杂样品的直接进样分析,基本克服了以往样品前处理复杂繁琐且耗费试剂人工等缺点,使得该技术在分析含量低干扰大检测困难的复杂样品时显示出巨大的优越性同时,该技术可实现柱前柱后痕量富集及制备等操作,并易于实现自动化操作[2,3,4]本实验建立断血流皂苷A血浆浓度的柱切换高效液相色谱测定方法为今后阐明断血流皂苷A的体内药代动力学行为新药研发以及相关制剂研究提供指导和依据。
    仪器与试剂Agilent公司1100系列高效液相色谱仪(包括DAD检测器);FCV-2A高压切换阀;高速离心机(上海安宁科学仪器公司);BSZ-2型自动双重水蒸馏系统(上海博通);Sartori-usBP221S型电子天平(美国Sartorius公司);TG328B型析天平(万分之一天平)(上海天平仪器厂)。色谱条件预处理柱(简称PC):大连装KromasilC18(20mm×4mm,5m);预处理流动相(简称PMP):甲醇-水;预处理流动相流速:1.0mL/min;分析柱(简称AC):Li-chrospher100RP-18e(250mm×4mm,5m);分析流动相(简称AMP):甲醇-0.01mol/mL磷酸盐缓冲液(磷酸调pH=3.0)(60∶40);分析流动相流速:0.6mL/min;分析柱柱温:45℃;检测波长:250nm
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