清络通痹颗粒含药血清对破骨细胞骨吸收的影响

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[摘要] 目的: 确定清络通痹颗粒( QLT) 含药血清的制备方法并观察其对体外培养破骨细胞的活性和骨吸收的影响。方法: 选用高效液相色谱外标一点法测定,QLT 含药血清中青藤碱的含量以确定含药血清的制备条件; 乳鼠破骨细胞1 × 108 /mL加入96 孔板,将QLT 3. 6,7. 2,14. 4 g·kg - 1 给药的大鼠含药血清1∶ 10 稀释,分别加入各孔培养48 h,观察其对破骨细胞增殖、抗酒石酸酸性磷酸酶( TRAP) 活性及破骨细胞形成的骨吸收陷窝的影响。结果: QLT 7. 2,14. 4 g·kg - 1 给药的含药血清可明显抑制破骨细胞的增殖能力和吸收陷窝面积( P < 0. 05,P < 0. 01) ,QLT 3. 6,7. 2,14. 4 g·kg - 1 给药的含药血清可明显抑制破骨细胞的TRAP 活性( P < 0. 05,P < 0. 01) 。结论: QLT 含药血清可抑制破骨细胞增殖、TRAP 活性和骨吸收能力,对破骨细胞引起的骨质破坏产生抑制作用。
    类风湿关节炎( rheumatoid arthritis,RA) 关节的局部骨质侵蚀是其重要的特点之一,也是导致关节功能障碍的重要因素。在RA 早期即可发生骨质破坏,而关节骨质破坏是关节畸变的重要因素,阻止其发生和进展可直接改善患者的预后。破骨细胞( osteoclast,OC) 作为骨吸收的主要功能细胞,在RA的发生与发展中起重要作用,在RA 的骨损伤处,特别是增殖的滑膜向骨内侵入的最前线,可见大量破骨细胞[1]。破骨细胞的数量与功能状态可影响骨质破坏的程度,因此抑制破骨细胞活性及减少破骨细胞生成是RA 防治研究的一个重要方面。
    清络通痹颗粒( Qingluo Tongbi granule,QLT) 是周仲瑛教授经过多年的临床实践选药组方,并运用无机陶瓷膜微滤技术精制而成的中药新制剂。该药临床疗效确切,前期实验证实对大鼠实验性关节炎有较好的治疗作用,可减轻关节炎大鼠的骨质破坏[2]。为了进一步研究其阻止RA 骨质破坏的机制,课题组选用高效液相色谱( HPLC) 外标一点法确定含药血清的制备条件,制备清络通痹颗粒的含药血清; 采用体外培养的破骨细胞,观察其对破骨细胞增殖、抗酒石酸酸性磷酸酶( TRAP) 活性及破骨细胞骨吸收的影响,以了解QLT 对破骨细胞的调控作用。
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