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关键词：
p21shRNA,姜黄素,肝癌细胞Huh7,细胞凋亡
发表时间：
2013-07-25 09:53:26
靶向p21的shRNA对姜黄素诱导肝癌细胞Huh7凋亡的影响
王子妮 | -> | 584| 0| 1.232865MB |p21shRNA,姜黄素,肝癌细胞Huh7,细胞凋亡
摘要: 探讨靶向p21 的shRNA 对姜黄素诱导肝癌细胞Huh7 凋亡的影响。采用RT-PCR 和Western blotting方法检测姜黄素对肝癌细胞Huh7 中p21 mRNA 和蛋白表达的影响; 构建针对p21 的shRNA 干扰表达载体pSi-p21; 采用RT-PCR 和Western blotting 方法检测pSi-p21 对p21 mRNA 和蛋白表达的影响; 通过DAPI 核染色法检测pSi-p21 抑制p21 表达后姜黄素诱导Huh7 细胞的凋亡情况。实验结果显示, 姜黄素能明显上调p21 mRNA和蛋白的表达水平。干扰载体pSi-p21 可以显著降低p21 的表达水平和抑制姜黄素诱导肝癌细胞Huh7 凋亡。研究结果提示, 姜黄素通过上调p21 的表达进而诱导肝癌细胞Huh7 发生凋亡。
p21 基因是1993 年发现并克隆的细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子 (cyclin-dependent kinase inhibitor ,CDKI) 的家族成员[1], 它参与细胞的多种功能活动。近年许多研究表明, p21 基因除了参与细胞周期调控外, 在细胞凋亡、细胞生长和细胞衰老等多种生理过程中也起着十分重要的作用[2]。姜黄素 (curcumin)是从姜科姜黄属植物姜黄 (curcuma) 根茎中提取的主要有效成分, 具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎、抑制血管生成等多种药理作用[3]。大量的研究已经证实, 诱导细胞凋亡是姜黄素发挥其抗肿瘤作用的主要机制[4]。虽然对姜黄素的药理作用及其分子机制已进行了广泛的研究, 但是多数工作是采用乳腺癌、大肠癌及白血病细胞株, 关于姜黄素抗肝癌的效果及其机制研究却很少报道。姜黄素能够诱导肝癌细胞Huh7 发生显著的凋亡[5], 但是其分子机制尚不清楚。本研究观察了姜黄素对肝癌细胞Huh7 中p21 表达水平的影响, 通过RNA 干扰 (RNAi) 的方法抑制p21 表达对姜黄素诱导Huh7 细胞凋亡的作用, 探讨p21 在姜黄素诱导肝癌细胞凋亡中的作用, 阐明姜黄素诱导肝癌细胞凋亡的分子机制, 为寻求治疗肝癌的临床有效药物提供实验依据。
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