己烯雌酚在斑马鱼胚胎中的生物蓄积及毒性机制研究

王雪诗 | -> | 644| 2| 0.214157MB |己烯雌酚,斑马鱼胚胎,毒性,QSAR,基因芯片

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摘要: 采用HPLC 和斑马鱼胚胎发育方法, 测定了己烯雌酚( DES) 在标准模式种斑马鱼胚胎体内的蓄积规律及胚胎毒性效应,并利用定量活性- 结构分析( QSAR) 和基因芯片技术, 探讨了DES 对斑马鱼胚胎的致毒机制. 结果表明, 在012 mgPL DES 中暴露24、48 和72 h 后, 胚胎体内的DES 含量分别为( 25178 ? 4195)、( 54188? 7110) 和( 711 93? 101 55) LgPg; 不同起始染毒时间( 0 hpf和8 hpf) 条件下, 亚致死最敏感指标均为72 h 孵化率抑制, EC50 分别为( 0114 ? 01 09) 和( 0133? 0114) mgPL, 说明胚胎在发育囊胚期( 发育8 h) 前对DES 暴露更为敏感. QSAR 研究发现, DES 相对其它酚类类雌激素对斑马鱼胚胎具有较高的毒性, 这与它具有较高的TE 值( 511121 7 eV) 相关; 基因芯片研究发现, 5 LgPL DES 暴露21 d 后能导致斑马鱼成鱼部分基因表达异常. DES 对斑马鱼具有一定的胚胎毒性和遗传毒性, 而生化反应是致毒的关键步骤.
    近年我国畜牧业的发展, 农药、兽药、饲料添加剂、动物激素等的使用, 为畜牧业生产和畜产品数量的增长发挥了一定作用, 同时也给畜产品安全带来了隐患. 己烯雌酚( diethylstilbestrol, DES) 是人工合成雌激素, 始于20 世纪40 年代, 主要用于鸡、牛、羊等的增肉剂, 鱼类生长促进剂等[ 1,2] . 它在生物体内不易降解, 通过食物链富集, 严重威胁着人类健康[ 3] .Hendry 等[4] 发现长期食用己烯雌酚等人工合成雌激素, 易导致儿童早熟、男性生殖系统发育异常与病变、女性易发生乳腺癌等. Shukuwa 等[ 5] 研究表明DES 会导致雄鼠催乳素细胞密度明显增加. 李和程等[ 6] 发现青春期较大剂量DES 暴露可使大鼠性成熟后睾丸生精细胞凋亡增加, 且随DES 暴露剂量增加而有加强趋势.
    国内外已有研究证明DES 具有潜在的遗传毒性和胚胎毒性[ 7] . 1998 年蒋义国等[ 8] 发现己烯雌酚可能是一种促癌因子, 可提高其它致癌物质的致癌性.Li 等[ 9] 研究发现孕期服用DES 后会导致DNA 甲基化异常, 影响胎儿生殖器官的发育, 同时也可能增加胎儿患生殖道癌症的风险.
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