自组装成环荧光显微成像技术在抗生素残留量检测中的应用

浪永明 | -> | 618| 1| 0.342554MB |米诺环素,内蒙古乳都乳,自组装成环(SOR)技术,荧光显微分析

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摘􀀁 要􀀁 提出了一种基于溶剂毛细流效应的微波加热自组装成环荧光显微成像技术, 并应用于内蒙古乳都乳中抗生素残留量检测。在六氢吡啶反应介质和聚乙烯醇􀀂124( PVA􀀂124) 存在下, 将米诺环素液滴滴在疏水性玻璃表面上, 当液滴受热挥发时, 形成直径约为1􀀁 54 mm, 环带宽为22􀀁 6 􀀁m 的自组装环。当点样体积为0􀀁 30 􀀁L 时, 线性范围为4􀀁 2 􀀂 10- 12 ~ 1􀀁 8 􀀂 10- 11 mo l r ing - 1 ( 1􀀁 4 􀀂 10- 6 ~ 0􀀁 60 􀀂 10- 5 mol L- 1 ) , 方法的检测限( 3􀀂) 为4􀀁 2 􀀂 10- 13 mo l r ing- 1 ( 1􀀁 4􀀂 10- 7 mo l L- 1 ) 。应用于内蒙古乳都乳中残留米诺环素和米诺环素胶囊中米诺环素含量的检测, 回收率分别为97􀀁 2% ~ 103% 和99􀀁 4%~ 102%, 相对标准偏差( RSD)小于1􀀁 2%。该方法建立了高灵敏、高选择性的痕量药物污染物分析新方法, 为内蒙古地方优势资源产品! ! ! 乳品中抗生素类药物残留量的定量检测提供理论依据, 同时对不同地区乳品中抗生素的来源、残留情况的系统动态研究及对乳品行业的管理、监督等具有重要的现实意义和更广泛的应用前景。
    近年来, 在禽畜产业领域应用抗生素对动物进行诊断、以亚治疗剂量添加于动物饲料中预防和治疗疾病[ 1, 2] 。另一方面, 随着畜牧业迅速发展, 乳牛患乳房炎等疾病的概率也随之增加, 抗生素作为通用药剂被广泛添加到乳牛饲料和用于乳牛机体注射[3] 。长期暴露于低剂量抗生素环境中的微生物、生物、动物和人, 将产生大量耐药细菌[ 2] , 对机体健康存在潜在威胁, 同时也造成研制一种新抗生素的速度远远赶不上细菌产生耐药性速度的局面。因此, 牛奶中抗生素类药物残留量问题逐渐成为公众关注的焦点。我国目前国内市场中消毒牛奶、奶粉、婴幼儿奶粉和生牛奶中抗生素超标现象十分严重[3, 4] , 以至引起了人们对牛奶安全问题的担忧。同时, 我国乳和乳制品在外贸出口中常常成为外国∀ 绿色技术壁垒# 的受害者, 造成巨大的经济损失[5] 。
    开发高灵敏度的抗生素检测技术以解决我国当前乳和乳制品行业面临的难题已成为当务之急[ 6] 。目前抗生素残留检测的方法大致分为微生物测定法( 如戴尔沃检测法, 国标T TC 法) [ 7] 、化学分析法[8, 9] 及生物和化学的酶联免疫测定法[ 10] 等, 各种方法均有不同特点。寻找一种耗样量少、灵敏度高的检测新方法, 仍是一项非常重要和迫切的工作。
    米诺环素( Minocy cline, MC) 是高效、速效、长效的半合成四环素新制剂, 抗菌作用在该属中最强。近几年对牛奶中四环素类药物残留检测方法的相关报道主要有高效液相色谱等方法[ 11, 12] 。黄承志先生开发、利用的毛细流定向组装成环技术( self􀀂or der ed r ing , SOR) , 已用于环境中污染无机物、核酸和蛋白质等分析, 并得到满意结果[ 13􀀂17] 。本文通过对实验条件的优化, 成功地将此法应用于内蒙古乳都乳和国内行业乳品中残留米诺环素及米诺环素胶囊中米诺环素含量的检测, 回收率分别为97􀀁 2%~ 103%和99􀀁 4%~ 102%, 本实验样品前处理简单, 只需将样品稀释200 倍即可, 且需用量小,微升级点样。当0􀀁 30 􀀁L 点样时, 检测限为4􀀁 2 􀀂 10- 13 molr ing- 1 ( 1􀀁 4􀀂 10- 7 mo l L- 1 ) 。
    本文建立了操作简单、高灵敏、高选择性的痕量药物污染物分析新方法, 为内蒙古地方优势资源产品! ! ! 乳品中抗生素类药物残留量的定量检测提供理论依据, 同时对研究不同地区乳品中抗生素的来源、残留情况的系统动态研究及对乳品行业的管理、监督等具有重要的现实意义和更广泛的应用前景。
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