基于高效凝胶渗透色谱法的银耳多糖质量控制研究

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摘 要:目的建立银耳多糖质量控制方法。方法采用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)法测定银耳多糖相对分子质量及其分布和多糖的量。色谱条件:Shodex Sugar KS-804(300 mm×8 mm,7 μm)和KS-805(300 mm×8 mm,17 μm)凝胶排斥色谱柱串联做为分离柱,流动相为水,体积流量0.8 mL/min,柱温40 ℃,进样量40 μL,检测条件为示差检测器。结果银耳多糖峰出现在14.40~15.30 min,对应相对分子质量为1.26×106~1.39×106。在0.01~2.0 mg/mL 呈良好的线性关系(r=0.999)。银耳多糖质量浓度范围分别为:1.1~1.5 mg/mL(以透析银耳多糖为对照)和0.8~1.1 mg/mL(以蓝色葡聚糖为对照)。多糖检测限和定量限分别为0.8 μg 和2 μg。结论所建立的方法简单、快速、准确、重现性好、灵敏度较高,可作为银耳多糖质量控制的方法。
    银耳 Tremella fuciformis Berk.又名白木耳、雪耳。银耳属担子菌门,异隔担子菌纲,银耳目,银耳科,银耳属。银耳既是一种经济价值很高的食用菌,又是医学中一种久负盛名的良药[1]。据《中药大辞典》记载,银耳具有滋阴、润肺、养胃、生津等功效[2]。主要用于治疗虚劳咳嗽,痰中带血和虚热口渴。文献报道银耳中含有丰富的银耳多糖,具有增强机体的免疫功能、抗氧化作用、促进蛋白质和核酸合成、降低游离胆固醇、抗心肌细胞凋亡等功效[3-6]。除了在临床上和其他中药配伍用于疾病治疗外,银耳还具有诸如作为增强免疫功能的健康食品开发的潜在市场价值,现在市场上出现了不少银耳多糖的开发产品。但随着产地、品种、采收季节的不同,银耳多糖的量及相对分子质量有一定差异,这对银耳相关产品质量是一个挑战。为了保证产品质量,本实验对银耳多糖质量控制进行了研究。
    本实验采用高效凝胶渗透色谱(high performance gel permeation chromatography,HPGPC)法[7-8]对银耳多糖相对分子质量分布及多糖量的测定进行了研究,并对其准确性、精密度、稳定性和专属性等方法学进行了研究,提供了一种便捷、有效的银耳多糖质量控制方法。
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