HPLC同时测定白花蛇舌草中咖啡酸、槲皮素和山柰酚

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摘要:目的:建立一种同时测定白花蛇舌草中咖啡酸、槲皮素和山柰酚含量的方法。方法:应用高效液相法测定咖啡酸、槲皮素和山柰酚的含量,色谱柱为Alltima C18柱(250 mm ×4. 6 mm, 5μm) ;流动相为甲醇(A) 20. 5%冰醋酸梯度洗脱(0~15 min, 30%~60% A; 15~30 min, 60%~60% A) ;流速为1 mL /min;检测波长为350 nm;柱温为30 ℃。结果:测得5个产地白花蛇舌草中咖啡酸、槲皮素和山柰酚的平均量分别在14. 218~23. 695μg/g、9. 919~25. 564μg/g和6. 229~18. 160μg/g;咖啡酸含量测定的线性范围为0. 005 0~0. 200 0μg ( r = 0. 999 9) ,平均加样回收率为102. 35% , RSD 为2. 31% ( n = 6) ;槲皮素含量测定的线性范围为0. 006 2~0. 244 0μg ( r = 0. 999 9) ,平均加样回收率为101. 84% , RSD为1. 79% ( n = 6) ;山柰酚含量测定的线性范围为0. 007 8~0. 310 6μg ( r = 0. 999 9) ,平均加样回收率为99. 04% , RSD 为2. 90% ( n = 6) 。结论:本实验中所建立的色谱方法可以简便、准确测定白花蛇舌草中咖啡酸、槲皮素和山柰酚的含量,重现性好。
    白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Wild)是茜草科植物,广泛分布于亚热带地区。我国广西、广东、江西、浙江、江苏、安徽等地均有生长,药理研究表明,其具有抗菌、增强免疫功能、抗肿瘤、抗衰老等作用[ 1 ] 。近年来广泛用于治疗各种肿瘤而受到越来越多的重视。该药材中主要含有三萜、苯丙素、黄酮、甾醇、蒽醌、环烯醚萜苷、有机酸等成分[ 2, 3 ] 。其中三萜中的熊果酸、齐墩果酸具有明确的抗肿瘤作用[ 4, 5 ] ;苯丙素中的咖啡酸均具有抗氧化、抗肿瘤等功效[ 6, 7 ] ;黄酮中的槲皮素对多种致癌剂、促癌剂有拮抗作用,且可以抑制多类恶性肿瘤的生长[ 8 ] ;而黄酮中的山柰酚可刺激网状内皮系统增生,加强吞噬细胞的能力[ 9 ] 。现在有关白花蛇舌草中化学成分的分析与测定大部分是针对其中的有效成分熊果酸与齐墩果酸的[ 9, 10 ] ,但因为二者脂溶性较大,在其制剂白花蛇舌草注射液中未发现二者的存在;现行的白花蛇舌草注射液的质量控制方法一般采取的是测定其中总黄酮的含量。本研究首次通过高效液相色谱法同时测定白花蛇舌草中咖啡酸和黄酮中槲皮素、山柰酚的含量,方法简便,灵敏准确,以期为白花蛇舌草药
材及制剂的质量控制提供定量依据的补充。
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