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贵州浓香型白酒窖池可培养细菌系统发育分析

陈彬斌 | -> | 1620| 1| 0.778994MB |微生物,窖泥,酒醅,芽孢杆菌,16SrDNA序列,系统发育分析

陈彬斌 陈彬斌 | 文档量 |浏览量5834

摘要: 从贵州某名酒厂浓香型白酒窖泥和酒醅中分离到477 株细菌,通过形态特征和生理特性检测等传统方法鉴定,发现绝大多数为芽孢杆菌(446 株),占总细菌株数的93.50 %,将形态和生理生化特征一致的芽孢杆菌归类为XJ-1~XJ-20 二十大类群。并采用16S rDNA 序列分析和测序,构建系统发育树。结果表明,芽孢杆菌属菌株中,以地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)为主,占总芽孢杆菌数的32.96 %;枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus) 和栗褐芽孢杆菌(Bacillus badius)也占有相当的比例,还有一定数量的Bacillus niabensis 和巴达维亚芽孢杆菌(Bacillus bataviensis)以及少量的球状芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)和不确定种芽孢杆菌(Bacillus sp.)。除芽孢杆菌属菌株之外,还分离出极少量的短短芽孢杆菌属(Brevibacillus)的不确定种菌株,占已分离总芽孢杆菌数的1.57 %。表明贵州地区浓香型白酒窖池中微生物具有明显的多样性,且地衣芽孢杆菌为其明显的优势种群,这和四川境内酒厂中的微生物类群相似,但也有区别。
   浓香型白酒的生产以泥窖窖池为基础, 发酵过程是栖息在窖池糟醅、窖泥中的庞大微生物群落在糟醅固、液、气三相界面进行着复杂的物质能量代谢过程。发酵过程中产生的黄水充当着窖泥与糟醅物质交换的载体,封窖发酵形成的窖内压力变化使酒糟中的养分和来自曲药、环境中的微生物及其代谢产物不断通过黄水进入泥中, 而窖泥中长期驯化的微生物种群及其代谢产物又不断地进入糟醅中, 物质能量交换不断影响着窖泥生态环境,促进了窖泥老熟和酒质的提高[1]。然而特定的地理、气候等环境条件造就了特定的微生物生长环境,所以,不同的酒厂生产的白酒呈现出不同的风味和品质。因此,分析白酒窖池中微生物的群落结构和亲缘关系, 对于研究中国白酒风味因子形成机理、有效的控制生产环境条件和名优白酒生产的品质,有着积极的意义[2]。
    大分子rRNA 及其基因rDNA 已被作为一个分子指标, 广泛地应用于各种微生物的遗传特征和分子差异的研究[3]。把待测菌株的16S rDNA 序列测定出来,然后与数据库中的已知菌种进行比较, 即可确定供试菌株的分类地位。这种方法不仅最大程度地保证结果的准确性和客观性, 而且对于微生物资源和环境的研究也有重要的价值。因此,本试验通过对分离到的细菌进行16S rDNA
的序列分析, 探讨贵州地区浓香型白酒窖泥和酒醅中微生物的组成和系统发育情况, 并且和四川境内的酒厂做了比较。前人对四川浓香型白酒糟醅中原核微生物已经做了大量研究[4]。在本研究中,贵州地区浓香型白酒窖池中微生物和四川境内酒厂中的微生物类群相似, 但也有区别。
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