求助，我最近做丝状真菌（顶头孢）的原生质体转化，转化效率很低

我最近做丝状真菌（顶头孢）的原生质体转化，转化效率很低。每次用约10的6次方到7次方的原生质体做转化，所加质粒有线性的有环状的，只能得到不到10个转化子。谁能介绍这方面实验的经验，如怎样铺板，哪些环节需要注意等？十分感谢！

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小幸运

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雷晓强

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1 个回答

郭金金

1、试剂不要出错，特别是buf的pH值很重要。
2、细胞壁裂解的程度要合适，最好预备实验确定下的。
3、离心时转速不要太高，能离下来就行了
4、悬浮时动作尽量轻柔

发布于 2010-12-08 16:42:21