可视化凝胶酶联免疫吸附分析法检测牛奶中庆大霉素和卡那霉素_徐飞

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    庆大霉素和卡那霉素是兽医临床上常用的氨基糖普类药物,特别是在奶牛隐形乳房炎和结核性乳
房炎的治疗上广泛使用[CIl。该类药品进入动物机体后与动物组织有很强的亲和力,残留时间较长,且
具有严重的耳毒性和肾毒性,可能影响神经传导、损害肠道的吸收,引发菌群失调,直接食用残留超标的
动物食品,会带来潜在的危害[Czl。因此,建立牛奶中这两种药物的残留可靠有效的分析方法非常必要。
    由于氨基糖普类药物缺乏相同母环结构,很难通过单克隆抗体技术筛选出广谱抗体,因此,采用传
统的酶联免疫吸附分析法(ELISA)无法实现多个氨基糖普类药物的同步检测。可视化凝胶ELISA方法
是近年来出现的一种新型检测模式,主要在免疫层析柱中完成,不同于传统的免疫亲和色谱用于样品净
化的目的[o.a},该方法是一种定性检测方法,经CN}r活化的Sephrose 4B凝胶作为固相载体,偶联羊抗
鼠IgG。加入单克隆抗体与固定的IgG特异性的发生反应,过量的单克隆抗体受重力作用直接流出小
柱。再从柱口处加入药物和酶标抗原,共同竞争有限的单克隆抗体,最后加入3}3'}5}5泅甲基联苯胺
(TMB)底物显色。呈现蓝色为阴性样本,呈现无色为阳性样本。通过在单一层析柱中设置多个凝胶检
测层,本方法可实现同步检测。可视化凝胶ELISA最早的文献报道始于2008年[[5],己有关于2}4}6扭
氯苯酚[0]、储曲霉毒素A }'}、苯并花[A]、玉米赤霉烯酮4葡萄糖普[9]检测的报道,主要侧重在液体样本
的检测,检测项目偏重于毒素和有机物[[I0]。对于组织样品中药物残留检测的报道较少。Yuan等[I I」报
道了奶、蜂蜜、鱼肉和虾肉样品中氯霉素的可视化凝胶ELISA方法。本实验室建立了牛奶、肌肉和肝脏
等组织中安普霉素的可视化凝胶ELISA方法,并与传统的直接竞争ELISA方法进行了比较[[I2]
    本研究在实验室前期基础上,开展了同步测定庆大霉素和卡那霉素凝胶ELISA方法的研究,实现
了牛奶中这两种药物的快速筛选,为食品安全监控提供了有效的技术手段。
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