高良姜中二苯基庚烷类化合物的高速逆流色谱分离制备_叶琼仙

摘要: 应用高速逆流色谱法( HSCCC) 分离纯化了高良姜中3 种二苯基庚烷类化合物。以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水( 2∶ 3∶ 1. 75∶ 1，v /v /v /v) 为两相溶剂系统，下相为固定相，上相为流动相，在主机转速为858 r /min、流速1. 5 mL/min的条件下，从122. 20 mg 高良姜石油醚萃取物中经一步HSCCC 分离可制备得到5R-羟基-7-( 4-羟基-3-甲氧基苯基) -1-苯基-3-庚酮( 7. 37 mg) 、7-( 4-羟基-3-甲氧基苯基) -1-苯基-4E-烯-3-庚酮( 9. 11 mg) 和1，7-二苯基-4E-烯-3-庚酮( 15. 44 mg) ，经高效液相色谱分析，纯度均大于93%，各化合物的结构由质谱和核磁共振氢谱、碳谱鉴定确证。该方法简便、快速、高效，可用于高良姜中二苯基庚烷类化合物的快速分离制备。

    高良姜为姜科山姜属植物高良姜( Alpinia officinarum Hance) 的干燥根茎，其性热味辛，归脾、胃经，具温胃散寒、消食止痛的功效，用于脘腹冷痛、胃寒呕吐、嗳气吞酸等［1］。高良姜主要分布于广东、海南、广西等，为“十大广药”之一。高良姜的化学成分复杂，主要含有黄酮类、挥发油和二苯基庚烷类化合物，目前已从其药材中分离鉴定了50 多种化合物［2］。
    高良姜中的二苯基庚烷类化合物含量较高、种类多，具有镇痛抗炎、抗氧化、抑制呕吐等多种生理活性［3 － 5］，是高良姜的主要药理活性成分。其中，5R-羟基-7-( 4-羟基-3-甲氧基苯基) -1-苯基-3-庚酮含量较高，已被证实具有抗呕吐［6］、抗肿瘤［7］、抗菌等多种药理活性，其他的二苯基庚烷类成分的药理活性还有待深入进行。因此建立二苯基庚烷类成分的高效分离制备方法对高良姜药材及其产品的开发利用具有重要的意义。但目前对二苯基庚烷类化合物的分离制备方法还局限于传统的柱层析，只有少数研究采用柱层析与制备高效液相色谱( HPLC) 相结合的方法［8，9］。这些传统的分离纯化方法具有耗时长、成本高、溶剂消耗量大、制备量小等的缺点，可快速、简便分离纯化高良姜中二苯基庚烷类化合物的方法鲜见报道。
    高速逆流色谱( HSCCC) 是一种简单的液-液分配色谱技术，无需固定相载体，避免了样品的不可逆吸附、失活等问题，样品只通过在互不混溶的两相溶剂间分配的不同而在短时间内实现高效分离［10 － 12］，且溶剂消耗少，成本低，亦有利于环保。本文将HSCCC 用于高良姜中二苯基庚烷类化合物单体的分离制备，旨在建立高良姜中活性成分对照品的快速、高效、低成本的制备方法，为高良姜药材的质量控制与深入的药理活性及作用机制研究提供必要的物质基础。
    本文经过溶剂系统的筛选与优化，通过一步HSCCC 分离即可从高良姜的石油醚萃取物中分离
纯化得到3 种化合物，并利用电喷雾电离质谱( ESIMS)、核磁共振氢谱( 1H-NMR) 和碳谱( 13C-NMR) 对其结构进行了确证。